[发明专利]二甲胺基丙基丙烯酰胺接枝琼脂糖凝胶色谱介质及制备方法和应用

权利要求书

1.一种二甲胺基丙基丙烯酰胺接枝琼脂糖凝胶色谱介质；其特征是色谱介质是平均粒径为40-165μm的琼脂糖凝胶颗粒，接枝链为聚二甲胺基丙基丙烯酰胺，示意结构式如下：

琼脂糖凝胶介质；

色谱介质是在琼脂糖凝胶多孔介质表面接枝聚二甲胺基丙基丙烯酰胺长链，n的长度是为离子交换容量除以溴化密度。

2.如权利要求1所述的色谱介质；其特征是离子交换容量在60-900mmol/L。

3.权利要求1的二甲胺基丙基丙烯酰胺接枝琼脂糖凝胶色谱介质的制备方法，其特征是：将溴化介质悬浮于N,N′-二甲基甲酰胺与水的混合溶液中，再向该悬浮液中加入单体二甲胺基丙基丙烯酰胺、溴化铜和2,2′-联吡啶，通氮气除氧，再向悬浮液中加入溴化亚铜，继续通氮气反应；之后置于水浴摇床中恒温反应，将反应液暴露于空气中使溴化亚铜被氧化以终止反应,用EDTA清洗除去铜离子，用乙醇和大量去离子水清洗介质，得到二甲胺基丙基丙烯酰胺接枝琼脂糖凝胶色谱介质；溴化介质示意结构式如下

溴化介质。

4.如权利要求3所述的方法，其特征是N,N′-二甲基甲酰胺与水的混合液中N,N′-二甲基甲酰胺的浓度为50-90％，N,N′-二甲基甲酰胺与水的混合溶液的体积用量为5-10mL/g溴化介质。

5.如权利要求3所述的方法，其特征是单体二甲胺基丙基丙烯酰胺加入量为0.8-5mmol/g溴化介质。

6.如权利要求3所述的方法，其特征是溴化亚铜加入量为0.04-0.2mmol/mL溴化介质；溴化亚铜、溴化铜与联吡啶的摩尔比为1:0.5:2。

7.如权利要求3所述的方法，其特征是所述通氮气除氧反应时间30-60min。

8.如权利要求3所述的方法，其特征是水浴摇床中恒温反应时间8-48h，反应温度20-40℃。

9.权利要求1的二甲胺基丙基丙烯酰胺接枝琼脂糖凝胶色谱介质应用于蛋白质高效分离纯化。