[发明专利]BRAF基因全外显子二代测序多重PCR引物组合物、试剂及多重PCR-打断控制系统

权利要求书

1.一种用于BRAF基因全外显子二代测序的多重PCR引物组合物，其特征在于：包括SEQID NO：01至 SEQ ID NO：36所示的引物。

2.一种用于BRAF基因全外显子二代测序的试剂，其特征在于：包括权利要求1所述的用于BRAF基因全外显子二代测序的多重PCR引物组合物及打断、二代测序所需试剂。

3.根据权利要求1或2所述的用于BRAF基因全外显子二代测序的多重PCR引物组合物，其特征在于：

所述多重PCR引物组合物通过如下处理方法获得：

先用多重PCR扩增目的片段、凝胶电泳对PCR产物进行质控后，调整打断程序，将PCR产物打断至适合测序仪后，再进行后续实验。

4.一种用于BRAF基因全外显子二代测序的多重PCR-打断控制系统，其特征在于，包括：

检测模块，采用权利要求2所述的用于BRAF基因全外显子二代测序的试剂进行多重PCR-打断的二代测序；

显示模块，将检测结果转换为可视化数据，并将可视化的数据于显示设备进行展示；

分析模块：基于预设的质控程序对检测结果进行验证，并将验证结果于同一显示设备进行展示。

5.根据权利要求4所述的用于BRAF基因全外显子二代测序的多重PCR-打断控制系统，其特征在于：

运行所述检测模块，包括以下步骤：

步骤一：多重PCR扩增目的片段；

步骤二：凝胶电泳，对PCR产物进行质控；

步骤三：将PCR产物打断至适合测序仪的程度；

步骤四：文库构件，包括PCR产物纯化、末端修复、接头连接、片段筛选、文库PCR扩增、文库扩增产物纯化；

步骤五：测定DNA产物浓度；

步骤六：将扩增子碱基数*给定的深度，按计算结果将样品混合后稀释到上机浓度；

步骤七：油包水扩增、末班序列富集；

步骤八：置于序仪进行测序，获得检测结果。

6.根据权利要求5所述的用于BRAF基因全外显子二代测序的多重PCR-打断控制系统，其特征在于：

所述显示模块将步骤八中的检测结果转化为包括“7号染色体概图”、“测序结果”、“参考序列”三项数据的图表。

7.根据权利要求6所述的用于BRAF基因全外显子二代测序的多重PCR-打断控制系统，其特征在于：

所述分析模块直接以所述显示模块转化得到的图表为原始数据，与预设的数据进行对比，并向所述显示模块输出检测结果。