[发明专利]一种基质辅助激光解析串联飞行时间质谱分析橡子中缩合单宁的分析方法

权利要求书

1.一种基于基质辅助激光解析串联飞行时间质谱分析橡子中缩合单宁的分析方法，包括以下步骤：

1)提取：将橡子果实粉碎后经第一有机溶剂进行提取，得到缩合单宁的粗提液，蒸发除去所述缩合单宁的粗提液中的所述第一有机溶剂，得到缩合单宁的水相提取物，将所述缩合单宁的水相提取物冻干处理，得到缩合单宁粗提取物，向所述缩合单宁粗提取物当中加入第二有机溶剂，得到缩合单宁粗提取物溶液，所述第一有机溶剂和第二有机溶剂均为乙醇水溶液或丙酮水溶液，且第二有机溶剂浓度高于第一有机溶剂；

2)纯化：所述缩合单宁粗提取物溶液经纯化柱纯化处理后得到缩合单宁纯化物溶液，将所得缩合单宁纯化物溶液冻干处理，得到固体粉末为缩合单宁样品；

3)溶解：将所述缩合单宁样品溶于第三有机溶剂中，配制得到缩合单宁样品溶液，所述第三有机溶剂为50％～75％乙醇、30～75％丙酮溶液或50～70％乙腈溶液；所述缩合单宁样品溶液溶液浓度为5～20mg/mL；基质采用0.1％三氟乙酸和10％的乙腈溶液配制成饱和基质溶液，其中所述0.1％三氟乙酸的用量为所述基质重量的0.05～0.2倍，所述基质为α-氰基-4-羟基肉桂酸、2，5-二羟基苯甲酸或芥酸之中的一种；

4)混合：所述缩合单宁样品溶液和所述饱和基质溶液以1：2～5的体积比充分混合，得到混合溶液；

5)点样：取1～4μL混合溶液将其滴加在基质辅助激光解吸电离仪器的靶板上，利用基质辅助激光解析串联飞行时间质谱仪对橡子中的缩合单宁进行分析。

2.根据权利要求1所述的一种基于基质辅助激光解析串联飞行时间质谱分析橡子中缩合单宁的分析方法，其特征在于，在步骤1)中，将所述橡子果实粉碎至100～300目的颗粒，之后经第一有机溶剂进行提取，得到缩合单宁的粗提液，蒸发除去所述缩合单宁的粗提液中的所述第一有机提取溶剂，得到缩合单宁的水相提取物，将所述缩合单宁的水相提取物冻干处理，得到缩合单宁粗提取物，向所述缩合单宁粗提取物当中加入第二有机溶剂，得到缩合单宁粗提取物溶液，所述第一有机溶剂为70％乙醇溶液或70％丙酮溶液，所述第二有机溶剂为75％乙醇溶液或75％丙酮溶液。

3.根据权利要求2所述的一种基于基质辅助激光解析串联飞行时间质谱分析橡子中缩合单宁的分析方法，其特征在于，在步骤1)中所述提取过程的提取温度为50～60℃，回流时间为1.5～3小时。

4.根据权利要求1所述的一种基于基质辅助激光解析串联飞行时间质谱分析橡子中缩合单宁的分析方法，其特征在于，在步骤2)中，所述纯化柱为HP2MG大孔树脂或SephadexLH-20凝胶柱。

5.根据权利要求1所述的一种基于基质辅助激光解析串联飞行时间质谱分析橡子中缩合单宁的分析方法，其特征在于，在步骤2)中，所述纯化处理采用所述缩合单宁粗提取物与所述大孔树脂的质量比1:12.5～20的比例进行吸附，用2.5倍柱体积的水进行水相洗涤，除去部分糖，水相洗涤之后用75％的乙醇洗脱，75％的乙醇洗脱液为所述缩合单宁纯化物溶液。

6.根据权利要求1所述的一种基于基质辅助激光解析串联飞行时间质谱分析橡子中缩合单宁的分析方法，其特征在于，所述冻干处理过程为：将溶液在-20℃下冻成固体，然后在低于10Pa，温度为-70℃下的冻干机中冻干12h，得到固体粉末的过程。

7.根据权利要求1所述的一种基于基质辅助激光解析串联飞行时间质谱分析橡子中缩合单宁的分析方法，其特征在于，在步骤3)中，所述基质为2，5-二羟基苯甲酸。

8.根据权利要求1所述的一种基于基质辅助激光解析串联飞行时间质谱分析橡子中缩合单宁的分析方法，其特征在于，在步骤3)中，所述第三有机溶剂为50％的乙腈溶液或30％的丙酮溶液。

9.根据权利要求1所述的一种基于基质辅助激光解析串联飞行时间质谱分析橡子中缩合单宁的分析方法，其特征在于，在步骤3)中，所述缩合单宁样品溶液溶液浓度为10mg/mL。

10.根据权利要求8所述的一种基于基质辅助激光解析串联飞行时间质谱分析橡子中缩合单宁的分析方法，其特征在于，在步骤4)中，所述缩合单宁样品溶液和所述饱和基质溶液以1：3的体积比充分混合，得到混合溶液。