[发明专利]一种抗β诺达病毒的TAT-CP重组蛋白及用途

说明书

本发明公开了一种抗β诺达病毒的TAT‑CP重组蛋白及用途，抗β诺达病毒的TAT‑CP重组蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示。本发明的抗β诺达病毒的TAT‑CP重组蛋白，其中的TAT可以携带CP蛋白进入细胞，增强CP蛋白作为亚单位疫苗的免疫水平，显著提高激发CP蛋白特异性细胞毒性淋巴细胞反应水平，对于海水养殖鱼类β诺达病毒病有更高、更长久的保护效果；利用大肠杆菌表达TAT‑CP重组蛋白，表达量大，操作简单，成本低，安全性好。

技术领域

本发明属于基因生物工程技术领域，具体涉及一种抗β诺达病毒的TAT-CP重组蛋白及用途。

背景技术

β诺达病毒又叫神经坏死病毒，隶属于野田村病毒属，能导致海水鱼脑、神经及视网膜组织坏死，因此，由该病毒感染而引发的疾病又被称为病毒性神经坏死病。β诺达病毒具有较强的传染性，可感染石斑鱼、半滑舌鳎、大菱鲆、褐牙鲆等，患病死亡率接近100％，给海水养殖业造成了较大的经济损失。

海水养殖鱼类病毒性疾病治疗至今没有有效的药物，主要以预防为主。但是在实际的养殖生产中，养殖鱼类发生疾病时，滥用错用渔药的情况十分普遍。长期滥用药物不仅使药物的效果受到了限制，还可诱发病原微生物产生抗药性，导致“无药可用”，更严重的是药物在养殖动物体内残留和养殖环境的进一步污染。随着人们对食品安全和环境安全的重视，消除水产品药物残留隐患的抗病技术研究已显得尤为重要。疫苗作为抗生素的替代品，可使鱼类高特异抵御病原的攻击，减少鱼类病害的发生，保护生态环境，可以说鱼类疫苗的开发和应用具有重要而深远的意义。

鱼类疫苗根据制作工艺的不同，可以分为灭活疫苗、活菌疫苗(弱、减毒疫苗)和基因工程疫苗。灭活疫苗和活菌疫苗是利用物理或化学方法处理病原，使其失活或失去致病力，这种疫苗的优点是制备简单，免疫保护效果较好，但是存在着免疫力不持久和毒力会回复等缺陷。随着生物学技术的发展，基因工程疫苗的优势受到大家的关注。基因工程疫苗是利用基因工程的方法改造或重组病原体基因获得重组蛋白、质粒或完整病原体所构成的新型疫苗。

β诺达病毒的病毒粒子无外膜,只有一种衣壳蛋白，其基因组的RNA2序列编码病毒分子的衣壳蛋白，大小为37.8kd，对病毒的成功组装和入主细胞有着关键作用，同时其衣壳蛋白具有大量抗原表位，可诱导宿主产生保护性抗体。TAT是艾滋病病毒(HIV-1)的反式转录激活催化剂，已经成功地携带多肽、荧光标记蛋白、DNA及小分子药物等，实现体内外的跨膜递送。

但目前尚未有用TAT-CP重组蛋白作为疫苗预防海水养殖鱼类β诺达病毒病的报道。

发明内容

本发明的目的是克服现有技术的不足，提供一种抗β诺达病毒的TAT-CP重组蛋白。

本发明的第二个目的是提供一种编码抗β诺达病毒的TAT-CP重组蛋白的基因。

本发明的第三个目的是提供一种含有编码抗β诺达病毒的TAT-CP重组蛋白的基因的重组基因工程菌。

本发明的第四个目的是提供抗β诺达病毒的TAT-CP重组蛋白在制备抗β诺达病毒疫苗的用途。

本发明的技术方案概述如下：

一种抗β诺达病毒的TAT-CP重组蛋白，所述重组蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示。

编码抗β诺达病毒的TAT-CP重组蛋白的基因，所述基因的核苷酸序列如SEQ IDNO.1所示。

一种含有上述基因的重组基因工程菌Arctic-Express^TM(DE3)/pCzn1-TAT-CP，是将含有SEQ ID NO.1所示基因的质粒pCzn1-TAT-CP转化原核宿主菌E.coli Arctic-Express^TM(DE3)感受态细胞中获得。

抗β诺达病毒的TAT-CP重组蛋白在制备抗β诺达病毒疫苗的用途。