[发明专利]一组检测水稻非转基因抗除草剂基因OsALS的CAPS标记引物组及其应用在审
| 申请号： | 201910265647.X | 申请日： | 2019-04-03 |
| 公开（公告）号： | CN109825629A | 公开（公告）日： | 2019-05-31 |
| 发明（设计）人： | 李刚;李磊;林参;袁彩勇;王健;程保山;王迪 | 申请（专利权）人： | 江苏徐淮地区淮阴农业科学研究所 |
| 主分类号： | C12Q1/6895 | 分类号： | C12Q1/6895;C12N15/11 |
| 代理公司： | 北京高沃律师事务所 11569 | 代理人： | 赵晓琳 |
| 地址： | 223001 *** | 国省代码： | 江苏;32 |
| 权利要求书： | 查看更多 | 说明书： | 查看更多 |
| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 引物组 抗除草剂基因 核苷酸序列 反向引物R 非转基因 正向引物 水稻新品种 水稻 抗除草剂 水稻育种 检测 生产成本 工作量 应用 | ||
1.一组检测水稻非转基因抗除草剂基因OsALS的CAPS标记引物组，其特征在于，所述引物组包括正向引物OsALS-F和反向引物R，所述正向引物OsALS-F的核苷酸序列如SEQ IDNO.1或SEQ ID NO.2所示，所述反向引物R的核苷酸序列如SEQ ID NO.3或SEQ ID NO.4所示。
2.根据权利要求1所述CAPS标记引物组，其特征在于，所述水稻非转基因抗除草剂基因OsALS的CAPS标记酶切位点位于水稻第2号染色体第18237999bp处，多态性表现为G/A碱基差异。
3.权利要求1或2所述CAPS标记引物组在水稻育种中的应用。
4.权利要求1或2所述CAPS标记引物组在鉴定抗咪唑啉酮类除草剂水稻品种中的应用。
5.权利要求1或2所述CAPS标记引物组在鉴定抗咪唑啉酮类除草剂水稻基因型中的应用。
6.根据权利要求3～5任一项所述应用，其特征在于，所述CAPS标记引物组通过PCR的方式进行应用。
7.根据权利要求6所述应用，其特征在于，所述PCR的方法包括以下步骤：
(1)以水稻基因组DNA为模板DNA进行PCR反应，得PCR扩增产物；
(2)将所述部分扩增产物进行琼脂糖凝胶电泳，剩余部分进行酶切反应；
(3)酶切所述PCR产物后琼脂糖凝胶电泳；根据所述酶切产物的带型判断OsALS的等位基因型，所述PCR扩增产物大小、内切酶种类及酶切片段大小判断方法如下表所示：
8.根据权利要求7所述应用，其特征在于，步骤(1)所述PCR的反应体系以20μL计，包括10μL 2×Taq PCR MasterMix，1μL模板DNA，正、反向引物各1μL和7μL ddH2O。
9.根据权利要求7所述应用，其特征在于，步骤(1)所述PCR的反应程序为：94℃预变性5min；94℃变性45s，58℃退火45s，72℃延伸1min，34个循环；72℃延伸8min，4℃保存。
10.根据权利要求7所述应用，其特征在于，步骤(3)所述酶切的反应体系以10μL计，包括0.3μL限制酶、1μL buffer、5.7μL ddH2O和3μL PCR产物。
该专利技术资料仅供研究查看技术是否侵权等信息，商用须获得专利权人授权。该专利全部权利属于江苏徐淮地区淮阴农业科学研究所，未经江苏徐淮地区淮阴农业科学研究所许可，擅自商用是侵权行为。如果您想购买此专利、获得商业授权和技术合作，请联系【客服】
本文链接：http://www.vipzhuanli.com/pat/books/201910265647.X/1.html，转载请声明来源钻瓜专利网。
