[发明专利]一种高囊胚形成率ICR小鼠的培育方法

说明书

本发明涉及一种高囊胚形成率ICR小鼠的培育方法，属于实验动物繁育技术领域。为了解决现有的体外受精囊胚形成率低的问题，提供一种高囊胚形成率ICR小鼠的培育方法，包括选经产的ICR母鼠作为建系母鼠，使其与建系公鼠进行配对建系生产F1代小鼠，通过早期性别鉴定，选留母鼠作为回交用的F1代ICR母鼠；将F1代ICR母鼠与建系公鼠回交生产F2代小鼠，通过早期性别鉴定，选留母鼠作为回交用的F2代ICR母鼠；选留的F2代ICR母鼠与建系公鼠回交生产F3代小鼠，并在F3代小鼠中通过早期性别鉴定筛选出F3代雌鼠为高囊胚形成率的ICR小鼠。本发明能够有效克服体外2‑细胞发育阻滞，提高囊胚形成率的效果。

技术领域

本发明涉及一种高囊胚形成率ICR小鼠的培育方法，属于实验动物繁育技术领域。

背景技术

小鼠是医药研究的重要模式生物，在生命科学研究领域中一直被广泛应用，特别是人源化小鼠模型是研究人类疾病的活体替代模型，在阐明发病机制，药物筛选等方面有巨大优势和广泛应用前景，而这些模型的建立需要体外获得高发育潜能胚胎工程为基础。“试管婴儿技术”是19世纪人类生殖医学的一个重大发明，而“试管婴儿技术”对环境、培养基等有严格的要求，为保证稳定的成功率及子代的健康，需要一个敏感性和可靠性高的检验体系。

由于小鼠胚胎与人类胚胎有着几乎相同的发育经历，鼠胚试验成为检测人早期胚胎体外发育环境的最佳模式。大量科学试验发现大多数近交系和封闭群小鼠的受精卵体外培养经过第一次分裂后会出现发育停滞，不再继续发育成囊胚，这种现象称为2-细胞阻滞，2-细胞阻滞可导致体外胚胎基因的操作成功率大大降低，同时也是体外鼠胚试验的关键节点，影响试验的稳定性及结果的准确性。封闭群的ICR小鼠属于2-细胞阻滞系，发育至囊胚期胚胎大大降低，影响了对胚胎发育环境的判定。因此，急需要一种可以克服2-细胞阻滞的高囊胚形成率ICR小鼠，来建立一个稳定性和敏感性较高的胚胎检测体系；同时，现有技术中大多是通过改善体外受精时的发育质量来提高囊胚形成率，也存在操作不稳定的问题。如中国专利申请(公开号：CN105647853A)公开了一种改善体外受精雌性胚胎附植后发育质量的方法，是通过在体外受精实验中，在实验组通过添加视黄酸进行处理，提高囊胚率，实验过程过于复杂且成本高，可操作性差，且其正是由于受2-细胞阻滞现象而影响囊胚率的问题而需进行体外再处理的过程。

发明内容

本发明针对以上现有技术中存在的缺陷，提供一种高囊胚形成率ICR小鼠的培育方法，解决的问题是如何使得到的母鼠体外受精胚胎具有高囊胚形成率，克服体外胚胎发育阻滞。

本发明的目的是通过以下技术方案得以实现的，一种高囊胚形成率ICR小鼠的培育方法，该方法包括以下步骤：

A、选取经产的ICR母鼠作为建系母鼠，使建系母鼠与选取的建系公鼠进行配对建系生产F1代小鼠，在F1代小鼠中通过早期性别鉴定，选留母鼠作为回交用的F1代ICR母鼠；

B、将选留的F1代ICR母鼠与最初的建系公鼠回交生产F2代小鼠，并在F2代小鼠中通过早期性别鉴定，选留母鼠作为回交用的F2代ICR母鼠；

C、将选留的F2代ICR母鼠与最初的建系公鼠回交生产F3代小鼠，并在F3代小鼠中通过早期性别鉴定筛选出F3代雌鼠为高囊胚形成率的ICR小鼠。