[发明专利]基于外周血的肺癌早筛用的试剂盒

说明书

本发明公开了一种基于外周血的肺癌早筛用的试剂盒，包括：接头，其包括Tag序列、Poly N序列、第一发夹序列、第二发夹序列、第一索引序列、第一通用引物结合序列、第二通用引物结合序列和dUTP，第一索引序列用于区分不同外周血样本；PCR引物，其是针对肺结节相关且间接影响着细胞的增殖分化的358个基因而设计的引物，PCR引物用于与接头结合；以及捕获探针，其是针对肺结节相关且间接影响着细胞的增殖分化的358个基因而设计的探针，捕获探针用于外周血样本中的血浆的cfDNA的区域捕获。本发明提供的试剂盒能够用于肺癌早期疾病筛查，无创、高灵敏度诊断肺结节。

本申请是申请日为2017年06月07日、申请号为201710422812.9、发明名称为一种检测肺结节为良性或恶性的试剂盒及其应用的专利申请的分案申请。

技术领域

本申请涉及基因检测领域，特别涉及一种基于外周血的肺癌早筛用的试剂盒。

背景技术

肺癌是世界上发病率及死亡率最高的恶性肿瘤，每年死亡人数约140万，占所有恶性肿瘤死亡人数的18％。英国著名肿瘤学家Peto教授预言：如果中国不及时控制吸烟和治理空气污染，到2025年每年新发肺癌患者将超过100万。以现有的检测手段，约75％的肺癌患者在诊断时已属晚期，5年生存率约为15.6％。大众缺乏筛查意识，同时缺乏科学鉴别肺结节的方法，使肺癌发病率居高不下。肺癌是以肺结节形式表现出来，因此，肺癌早筛关键在于肺结节精确诊断。

肺结节为小的局灶类、类圆形、影像学表现密度增高的阴影，可为单发或多发。弥漫性或多发性结节，一般有胸外恶性肿瘤转移或活动性感染导致，原发性肺癌可能性相对较小。孤立性肺结节无典型症状，常为单个、边界清楚、密度增高、直径≤3cm且周围被含有气肺组织包绕的软组织影。随着肺癌中CT检查的普及和广泛应用以及近年来开展的低剂量CT筛查肺癌，使肺结节的检出率逐渐升高,它们可能代表恶性肿瘤，如原位腺癌及浸润性腺癌；或为癌前病变,如AAH；或为良性病变,包括局灶性间质纤维化或机化性肺炎、炎症及出血等。良、恶性病变的CT表现非常相似。有回顾性研究表明，通过CT影像进行8个大的肺癌筛查项目显示，肺结节的患病率是8％-51％，恶性肿瘤发病率为1.1％-12％。然而，CT仅仅是影像学结果，仅能确定结节的大小、形状等基本信息，需要经过医生肉眼观察，下定结论，依赖于医生的专业的知识和经验，并不能作为确诊的结果。

为了对肺结节进行确诊，目前临床上的做法是：在无法对影像学进行判断的情况下，进行手术取组织或穿刺活检对结节组织进行病理诊断。组织活检能够从细胞层面诊断结节是否癌变，是目前肺结节诊断的金标准。但是，由于肺结节的组织活检诊断在临床中并不提倡，有两方面原因：①肺结节大小一般小于3cm，需要凭借医生丰富的经验才能准确的穿刺取到结节组织；②手术是一种侵入性的手段，有一定的并发症风险。临床上还有另一种辅助检测手段，即肿瘤标志物。肿瘤标志物一般是与癌症相关蛋白标志物。由于这种蛋白标志物会受到受检者自身的影响，会影响结果的解读。因此，肿瘤标志物对癌症的诊断只能起辅助作用，并且灵敏度较低。临床上需要一种能够无创，高灵敏度诊断肺结节的检测手段。