[发明专利]一种从密蒙花中分离制备毛蕊花糖苷和蒙花苷的方法

说明书

本发明涉及一种从密蒙花中快速分离制备高纯度毛蕊花糖苷和蒙花苷的方法。提取方法主要包括以密蒙花为原料，干燥、粉碎处理后用醇溶液提取，减压回收醇溶液，得到密蒙花提取物。密蒙花提取物无须特殊处理，直接经高速逆流色谱分离纯化，得到高纯度毛蕊花糖苷和蒙花苷。本发明简单、合理，最终产品纯度高，可广泛应用于医药、卫生行业。

技术领域

本发明涉及一种快速分离制备高纯度毛蕊花糖苷和蒙花苷的方法，主要工艺包括醇提和高速逆流色谱分离。

背景技术

密蒙花为马钱科醉鱼草属植物密蒙花Buddleja officinalis Maxim.的干燥花蕾及花序。又名蒙花、米汤花、羊耳朵、小锦花、鸡骨头花、染饭花等，主要分布于我国西南及中南地区，野生资源十分丰富。密蒙花始载于《开宝本草》，为传统的眼科用药，具有疏风清热，养肝明目，退豁的功效。2015版《中华人民共和国药典》规定该花主要用于治疗目赤肿痛，多泪羞明，目生翳膜，肝虚目暗，视物昏花等疾病，在现代中医药治疗糖尿病视网膜病变的有效方剂中密蒙花的出现频率也较多。

糖尿病视网膜病变(diabetic retinopathy，DR)作为糖尿病最常见、最严重的微血管并发症之一，已成为大多数发达国家工作年龄人群致盲的首要原因。密蒙花作为传统重要的眼科用药，且在现代中医药治疗糖尿病视网膜病变的有效方剂中频现，表明密蒙花在防治糖尿病视网膜病变上具有良好的开发前景。现代研究表明密蒙花的主要活性成分为黄酮、苯乙醇苷、三萜及其皂苷类化合物，其中蒙花苷及毛蕊花糖苷为其主要成分，结合前期的研究与报道，发现两者在密蒙花中的含量均较高。同时目前从同一种植物中分离得到毛蕊花糖苷和蒙花苷的工艺未见报道。

毛蕊花糖苷(acteoside)又名洋丁香苷，结构式如图1，是传统中药地黄、玄参、密蒙花等药用植物的主要成分，同时也是名贵中药肉苁蓉的主要活性成分之一。现代药理研究表明毛蕊花糖苷对免疫系统、神经系统具有显著的作用，同时还具肝脏保护、补肾壮阳等广泛药理作用，具有较好的开发前景。

蒙花苷(linarin)又名刺槐苷，结构式如图2，是传统中药野菊花、密蒙花等药用植物的主要成分。现代药理学研究表明，蒙花苷具有抗炎镇痛、抑制大鼠晶状体醛糖还原酶(AR)、选择性的抑制乙酰胆碱酯酶等多种药理作用。特别是蒙花苷抑制醛糖还原酶的活性，可间接抑制多元醇通路，有可能开发成为一类延缓和阻断糖尿病并发症的药物，这与密蒙花的传统功效相契合。

虽然已有中国专利报道从密蒙花中提取蒙花苷的方法中国专利CN201610254587.8一种ASE方法提取密蒙花中蒙花苷的方法，该方法仅仅报道了从密蒙花中提取蒙花苷的方法，并未提及获得蒙花苷单体的相关方法。同时暂未见关于从密蒙花中制备毛蕊花糖苷的专利报道。

发明内容

本发明的主要目的是提供一种简便、快速、成本低廉的从密蒙花中同时制备高纯度毛蕊花糖苷和蒙花苷的方法。

本发明涉及一种制备毛蕊花糖苷和蒙花苷的方法，以马钱科醉鱼草属植物密蒙花的花及花序为原材料，经提取、浓缩后干燥、经高速逆流色谱进行制备纯化得到高纯度高纯度毛蕊花糖苷和蒙花苷，操作包括：

(1)、密蒙花药材粉碎后，用5-20倍量的40％-80％乙醇溶液对所述药材进行浸渍0.5小时，在60-80℃下热回流提取1-3次，每次0.5～2小时，合并提取液，过滤，减压浓缩至无醇味，烘干得密蒙花提取物。

(2)、将步骤(1)得到的提取物经高速逆流色谱进行制备纯化。在溶剂系统为乙酸乙酯-正丁醇-水(5∶0.5∶5，v/v/v)或(5∶0.8∶5，v/v/v)的溶剂系统，上相为固定相，下相为流动相。色谱仪旋转速度为800～950rpm，流动相流速为1.5～3ml/min，柱温为25～35℃、检测波长为313nm的条件下进行毛蕊花糖苷及蒙花苷的制备，根据高速逆流图谱显示收集各组分，并进行HPLC检测，可得到纯度≥96％的毛蕊花糖苷及纯度≥98％的蒙花苷。

优选的条件如下：