[发明专利]一种Tf修饰的负载双药的纳米颗粒制备方法及其应用

说明书

本发明涉及医药技术领域，具体涉及一种转铁蛋白(Tf)修饰的负载双药的纳米颗粒制备方法，包括以下步骤：将PEG‑PLGA两亲性聚合物、疏水性药物和亲水性药物混合，得到乳液一；将乳液一和乳化剂混合乳化，得到乳液二，乳液一与乳化剂的体积比为1∶5；对乳液二进行分离后得到负载的纳米颗粒；用Tf作为纳米颗粒的配体，以PEG‑PLGA两亲性聚合物作为骨架材料，采用乳化剂挥发法进行负载，得Tf修饰的负载双药的纳米颗粒。本发明的有益效果是：本发明选用具有毒性低、亲水性和生物降解性较好的PEG‑PLGA两亲性聚合物作为纳米药物载体，生物相容性好，无免疫原性，安全性高；并且PEG的亲水基团能够减少血液对纳米粒的调理作用，从而延长药物的血液半衰期。

技术领域

本发明涉及医药技术领域，具体涉及一种Tf修饰的负载双药的纳米颗粒制备方法及其应用。

背景技术

脑缺血一定时间恢复血液供应后，其功能不但未能恢复，却出现更严重的脑功能障碍，称为脑缺血 /再灌注(CIR)损伤，其机制较为复杂，主要与自由基过度形成、兴奋性氨基酸毒性、细胞内超钙、炎性反应等多种机制有关。炎症反应的标志是白细胞的浸润和小胶质细胞、星形胶质细胞的激活。炎症细胞可以释放出细胞毒素，包括活性氧、炎症因子而加重脑损害，小胶质细胞与缺血再灌注的炎症反应密切相关，可以认为是脑中潜在的巨噬细胞：小胶质细胞在缺血后的几分钟内激活，同时增多的白介素 1β、与肿瘤坏死因子α可以导致小胶质细胞进一步活化。所以过往的研究已经发现，神经细胞，内皮细胞以及小胶质细胞在缺血再灌注中具有重要的作用，抑制神经细胞和内皮细胞的损伤，同时抑制小胶质细胞激活，可以达到协同作用，减轻缺血再灌注的损伤。

丁苯酞对于缺血性卒中有着很好的保护作用，对于神经保护和内皮细胞的保护均有很好的作用，可以通过多种机制减轻缺血引起的脑损伤，包括：改善微循环、抗血小板、抗氧、抗氧化等作用。米诺环素是一种四环素类的抗生素，但是近年来，较多的文献表明，米诺环素对于神经炎症有着很好的抑制作用，还有文献表明，米诺环素可以抑制肠道菌，改善肠道微环境，极大的增加了米诺环素的适用范围，在神经炎症的研究中发现，米诺环素可以抑制小胶质细胞的激活，其作用和p38MAPK、氧化损伤、PKC 的激活等有关，也有直接证据表明，在缺血再灌注模型中，米诺环素可以起到神经保护作用。鉴于丁苯酞、米诺环素在缺血再灌注中的作用，两者具有不同的药理作用，可以从神经细胞、内皮细胞、胶质细胞等多靶点起到作用，协同的保护脑缺血再灌注。所以申请人设计将丁苯酞和米诺环素制备为双载药的纳米颗粒，同时经过转铁蛋白(Tf)修饰，由于Tf可以和中枢神经中TfR相结合，起到靶向中枢的作用，同时纳米粒具有很好的脂溶性，可以透过血脑屏障，所以该双载药的纳米粒从理论上有着缺血再灌注的协同保护作用，同时兼具良好的脑靶向性，对于缺血再灌注的药物研究有着一定的积极意义。

发明内容

本发明的目的在于提供一种Tf修饰的负载双药的纳米颗粒制备方法及其应用，以解决上述背景技术中提出的问题。

为实现上述目的，本发明提供如下技术方案：

一种Tf修饰的负载双药的纳米颗粒制备方法，包括以下步骤：

(1)将PEG-PLGA两亲性聚合物、疏水性药物和亲水性药物混合，得到乳液一；

(2)将乳液一和乳化剂混合乳化，得到乳液二，乳液一与乳化剂的体积比为1∶(5-20)；

(3)对乳液二进行分离后得到负载的纳米颗粒；

(4)用Tf作为纳米颗粒的配体，以PEG-PLGA两亲性聚合物作为骨架材料，采用乳化剂挥发法进行负载，得Tf修饰的负载双药的纳米颗粒。

作为本发明的进一步技术方案为：所述PEG-PLGA两亲性聚合物中的PLGA的末端为羧基或羟基，其分子量在10000-30000；PEG的末端为氨基和马来酰胺。