[发明专利]一种用于鉴定苹果新品种“赤霞”指纹图谱的SSR分子标记及其应用

权利要求书

1.一种鉴定苹果新品种‘赤霞’的SSR分子标记，其特征在于：所述分子标记为如下所示的14对SSR标记，分别为：SSR标记CH01d08，SSR标记CH01f02，SSR标记CH01f07a，SSR标记CH02b10，SSR标记CH02d08，SSR标记CH02c02a，SSR标记CH05e03，SSR标记Hi03a10，SSR标记Hi04a05，SSR标记Hi23d06，SSR标记GD 12，SSR标记GD 142，SSR标记GD 147，SSR标记NH009b；用于扩增上述标记的引物分别为：

SSR标记CH01d08核苷酸序列如SEQ ID No.1、2所示；

SSR标记CH01f02核苷酸序列如SEQ ID No.3、4所示；

SSR标记CH01f07a核苷酸序列如SEQ ID No.5、6所示；

SSR标记CH02b10核苷酸序列如SEQ ID No.7、8所示；

SSR标记CH02d08核苷酸序列如SEQ ID No.9、10所示；

SSR标记CH02c02a核苷酸序列如SEQ ID No.11、12所示；

SSR标记CH05e03核苷酸序列如SEQ ID No.13、14所示；

SSR标记Hi03a10核苷酸序列如SEQ ID No.15、16所示；

SSR标记Hi04a05核苷酸序列如SEQ ID No.17、18所示；

SSR标记Hi23d06核苷酸序列如SEQ ID No.19、20所示；

SSR标记GD 12核苷酸序列如SEQ ID No.21、22所示；

SSR标记GD 142核苷酸序列如SEQ ID No.23、24所示；

SSR标记GD 147核苷酸序列如SEQ ID No.25、26所示；

SSR标记NH009b核苷酸序列如SEQ ID No.27、28所示。

2.利用权利要求1所述的鉴定苹果新品种‘赤霞’的SSR分子标记构建指纹图谱，其特征在于：具体方法为：以苹果新品种‘赤霞’基因组DNA为PCR扩增模板，分别以所述SSR分子标记为引物对，进行PCR扩增，用2%的琼脂糖凝胶电泳检测PCR产物，在紫外观测仪上观察电泳结果；用QIAxcel Advanced全自动实时毛细管电泳系统进行分析检测，并读取相应数据，获得指纹图谱。

3.根据权利要求2所述的利用鉴定苹果新品种‘赤霞’的SSR分子标记构建指纹图谱，其特征在于：PCR扩增反应体系为20 μL，其中含10 × PCR Buffer 2.0 μL、2.5 mM 的dNTPsmixture 1.6 μL、10 ng/μL 的Primers F 0.15 μL、10 ng/μL 的Primers R 0.15 μL、5U/μL 的Taq 聚合酶0.2 μL、100ng/μL 的DNA模板2.0 μL，去离子水补足至13.9 μL；

PCR扩增程序为：94℃预变性2 min 30 s，94℃变性30 s，60℃退火30 s，72℃延伸40s，35个循环，72℃ 10 min，4℃保存备用。

4.根据权利要求2所述的利用鉴定苹果新品种‘赤霞’的SSR分子标记构建指纹图谱，其特征在于： 琼脂糖凝胶电泳缓冲液为1×TBE缓冲液，恒定电压150 V条件下电泳约0.5 h，关闭电源，停止电泳，取出凝胶，在紫外观测仪上观察电泳结果。