[发明专利]一种产肌氨酸氧化酶菌株的筛选方法在审
| 申请号： | 201910270719.X | 申请日： | 2019-04-04 |
| 公开（公告）号： | CN109897805A | 公开（公告）日： | 2019-06-18 |
| 发明（设计）人： | 迟乃玉;刘洋;张庆芳;于爽;希伦 | 申请（专利权）人： | 大连大学 |
| 主分类号： | C12N1/20 | 分类号： | C12N1/20;C12R1/07 |
| 代理公司： | 大连八方知识产权代理有限公司 21226 | 代理人： | 朱秀芬 |
| 地址： | 116622 辽*** | 国省代码： | 辽宁;21 |
| 权利要求书： | 查看更多 | 说明书： | 查看更多 |
| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 菌株 酶活 肌氨酸氧化酶 筛选 稀释 筛选培养基 低温生长 分离纯化 海洋来源 菌种保存 细菌菌落 细菌筛选 医学检测 透明圈 无菌水 悬浮液 菌落 产酶 划线 细菌 应用 研究 | ||
1.一种产肌氨酸氧化酶菌株的筛选方法，其特征在于，所述方法包括以下步骤：
(1)将海洋来源样品接入富集培养基中培养，温度设置在20-30℃恒温培养，同时每天测肌酸降解率，待肌酸降解至80％以上时，再培养2天；
(2)产肌氨酸氧化酶菌株的分离：将步骤(1)中肌酸已降解完全的培养基，用无菌水稀释，稀释后涂布在筛选培养基中，温度设置在20-30℃条件下恒温培养4-5天；
(3)产肌氨酸氧化酶菌株的初筛：挑取有透明圈的细菌菌落，通过三区划线进行分离纯化，温度设置在20-30℃条件下恒温培养4-5天，获得单一菌落，进行镜检，通过观察菌落形态，初步鉴定菌种；
(4)产肌氨酸氧化酶菌株的复筛：测定酶活，最终挑选一株产肌氨酸氧化酶酶活最高的的菌株，进行菌种保存，即筛选出目标菌株。
2.如权利要求1所述的一种产肌氨酸氧化酶菌株的筛选方法，其特征在于，步骤(1)中样品接入富集培养基中的接入量为富集培养基体积的5％。
3.如权利要求1所述的一种产肌氨酸氧化酶菌株的筛选方法，其特征在于，步骤(1)中富集培养基配方：肌酸5.0-10.0g，酵母膏0.5-5.0g，氯化钠2.0-5.0g，磷酸二氢钾1.0-5.0g，磷酸氢二钾0.5-5.0g，硫酸镁0.5-5.0g，淀粉10.0-15.0g，碘化钾1.0-5.0g，琼脂20.0-30.0g，蒸馏水1.0-1.5L，高温灭菌后保存，温度控制在100-200℃。
4.如权利要求1所述的一种产肌氨酸氧化酶菌株的筛选方法，其特征在于，步骤(2)中筛选平板培养基配方：肌酸5.0-10.0g，酵母膏0.5-10.0g，氯化钠2.0-10.0g，磷酸二氢钾1.0-10.0g，磷酸氢二钾0.5-10.0g，硫酸镁0.5-10.0g，淀粉10.0-20.0g，碘化钾1.0-10.0g，琼脂20.0-40.0g，蒸馏水1.0-1.5L，高温灭菌后保存，温度控制在100-200℃。
该专利技术资料仅供研究查看技术是否侵权等信息，商用须获得专利权人授权。该专利全部权利属于大连大学，未经大连大学许可，擅自商用是侵权行为。如果您想购买此专利、获得商业授权和技术合作，请联系【客服】
本文链接：http://www.vipzhuanli.com/pat/books/201910270719.X/1.html，转载请声明来源钻瓜专利网。
