[发明专利]一种鼠曲草一测多评的质量评价方法

说明书

本发明公开了一种一测多评法评价鼠曲草质量控制方法，首先建立鼠曲草中4种主要药效成分的HPLC含量测定方法，以绿原酸作为内参物，计算其他3种活性成分的相对校正因子，并考察相对校正因子的系统适用性和方法重现性，根据相对保留时间进行色请峰定位，再结合相对校正因子算各待测成分的含量，通过一测多评法与外标法的相互验证，证明含量测定结果无显著差异。本发明方法克服了对照品成本高、不易得等难题，通过相对校正因子及色谱峰定位计算指标成分含量，实现鼠曲草中多种药效物质的同步测定，可节省成本、简化操作，提高效率，且检测灵敏度高，稳定性好，测定结果准确可靠，对鼠曲草质量控制和临床疗效的保证具有重大意义。

技术领域

本发明属于中药成分检测技术领域，涉及一种鼠曲草一测多评的质量评价方法。

背景技术

鼠曲草(Gnaphlium affine D.Don)又名：鼠耳草、佛耳草、追风骨、清明菜、秋菊草等，属菊科植物鼠曲草全草，药食两用，全草可入药，性味甘平、无毒，具有祛痰、止咳、平喘、祛风湿之功效；尤其润肺化痰效果，可替代川贝母入药，其药材标准收载于《中国药典》(1977)版，《江苏省中药材标准》(1989)版。研究表明，鼠曲草含有多种生物活性成分，具有丰富的营养价值，鼠曲草中含大量类黄酮、二萜类、矿物质和氨基酸，此外，还含少量的植物甾醇、鞣酸、多糖等，故其药理作用广泛、营养价值极高。鼠曲草的主要生物活性是黄酮类，而黄酮类化合物具有抗氧化、抗过敏、抗菌、抗突变、抗肿瘤、保护心脑血管系统和抗病毒等广泛的生理活性。中药的多成分、多功效的作用特点，决定着单一成分难以表达中药的内在质量，因此，应选择多成分、多指标的测定，对与功效相关的化学成分进行全面综合的评价。但多指标质量控制面临着对照品短缺及相应的检测成本费用高等问题，为解决这一问题，王智民提出了一种新的评价中药内在质量模式，即一测多评法(quantitative analysisof multi-components bysingle marker，QAMS)。QAMS以样品中某一成分为内参物，建立该成分与其他成分间的相对校正因子，通过相对校正因子计算其他成分量。该方法具有快速、简便并能同时实现多成分同步测定等优点，已被《中国药典》2010年版收录。因此本实验采用QAMS技术，以绿原酸为内参物，计算咖啡酸、异毛蕊花糖苷和异泽兰黄素的相对校正因子，建立鼠曲草药材的QAMS方法，为鼠曲草质量控制提供新的评价模式。同时验证了一测多评法的计算值和外标法测定值间无显著差异，实验所得的校正因子可信。

一测多评法(quantitative analysis of multicomponents by single marker，QAMS)指利用中药有效成分内在的函数关系和比例关系，只测定其中的一个成分(对照品易于得到)，来实现多个成分(对照品难以得到或供应)的同步测定，是适合中药特点的多指标质量评价模式。在对照品不足的情况下，利用相对校正因子(relative correctionfactor，RCF)对药材进行质量控制是方便、快速、廉价的，其方法将会是中药多组分同步定量的发展方向。目前，用一测多评法评价中药材质量的相关文献较少，而用一测多评法同时测定鼠曲草中多种不同类型成分的含量的未见报道。

发明内容

本发明的目的是提供一种鼠曲草一测多评的质量评价方法，解决了鼠曲草在含量测定时标准品品种多，含量测定方法复杂的问题。

本发明所采用的技术方案是，一种鼠曲草一测多评的质量评价方法，具体步骤如下：

步骤1，标准溶液的制备：制备绿原酸、咖啡酸、异毛蕊花糖苷为和异泽兰黄素四种标准溶液；

步骤2，供试溶液的制备：取鼠曲草药材粉碎过筛，置于容量瓶中，加入溶剂定容，定容后冷浸、超声或者回流提取，取上清液用微孔滤膜滤过，得到供试溶液；

步骤3，取经步骤1中制备的四种标准溶液分别稀释后与步骤2中制备的供试品溶液一起注入高效液相色谱仪，进行色谱条件检测分析，得到高效液相色谱图；