[发明专利]一种室内模拟水华的稳定培养方法

权利要求书

1.一种室内模拟水华的稳定培养方法，其特征在于，包括以下步骤：

1）从野外水华暴发的水体中采集微藻，去除肉眼可见的杂质，密封，备用；

2）采集野外自然水体并经过0.45μm膜过滤后，通过添加硝酸盐和/或磷酸盐，调节所述水体的总氮为0.5~2.5 mg/L和总磷为0.05~0.25 mg/L，高温灭菌后即得到微藻培养液；再在无菌环境下将步骤1）得到的微藻接种到所述微藻培养液中，置于光照培养箱中扩培3~5天，然后将扩培后的微藻离心弃上清，并用所述微藻培养液润洗2~5次；

3）将步骤2）得到的微藻接种到恒化器中培养10-15天，即得到稳定的混合微藻；所得到的混合微藻的细胞浓度在6.68×10⁴~512.17×10⁴cells/mL范围，叶绿素A达11.24~197.39μg/L；

步骤2）和步骤3）中所述微藻的培养条件是温度为20~30℃，光照强度为2000~2500lux，光暗比为12h:12h，通气量为100 ml/min；

所述恒化器包括密闭设置的反应釜（1），所述反应釜（1）内具有与釜壁间隔设置的水华培养室（11），所述水华培养室（11）和釜壁之间形成密闭的水浴腔（12），所述釜壁的底部和顶部各设置有一个与所述水浴腔（12）连通的水浴口，两个所述水浴口连接有恒温冷水机（7）；所述水华培养室（11）内还设置有用于搅拌培养液的搅拌机构（4）；所述反应釜的底部设置有与所述水华培养室（11）相通的通气口（5），所述通气口（5）通过管道连接有泵气机构；所述培养装置还包括用于输送营养物的进样单元、光源单元和藻液回流单元，所述进样单元包括进样瓶（21），所述进样瓶（21）通过管道连接有进样泵（22）并延伸至所述反应釜内，并位于水华培养室（11）内微藻培养液液面上方；

所述藻液回流单元包括密闭设置的回流瓶（62）和过滤瓶（64），所述回流瓶（62）和过滤瓶（64）通过水系过滤膜（63）连通设置；所述回流瓶（62）上连接有主动回流管道和被动回流管道，所述主动回流管道的一端伸入所述回流瓶（62）的液面下，另一端连接有回流蠕动泵（61），所述回流蠕动泵（61）通过主动回流管道连接至所述反应釜内，并位于水华培养室（11）的微藻培养液液面上方，所述被动回流管道的一端伸入所述水华培养室（11）内微藻培养液液面处，另一端连接至所述回流瓶（62）的液面上方；所述过滤瓶（64）通过出水管道连接有出水泵（33），所述出水管道伸入所述过滤瓶（64）的液面下方；

所述恒化器的稀释率为0.1~0.6，所述回流比为1:0.5~1:2.0，所述搅拌机构的搅拌速度为150~250 r/min。

2.根据权利要求1所述室内模拟水华的稳定培养方法，其特征在于，所述搅拌机构包括可转动地竖向设置在所述水华培养室的搅拌轴（41）和沿所述搅拌轴径向设置的搅拌件（42），所述搅拌轴上端延伸至反应釜外，并与电机的输出轴相连接，使搅拌轴在电机的控制下旋转；所述搅拌件（42）沿搅拌轴（41）周向均布设置的三组双叶叶片。

3.根据权利要求2所述室内模拟水华的稳定培养方法，其特征在于，所述叶片为45°斜叶，且每组叶片之间互呈60°。

4.根据权利要求1所述室内模拟水华的稳定培养方法，其特征在于，所述水系过滤膜（63）的孔径为0.45~2μm。

5.根据权利要求1所述室内模拟水华的稳定培养方法，其特征在于，所述反应釜的水华培养室（11）中还包括用于混合水华的塑料珠（8），所述塑料珠的密度与水的密度接近。

6.根据权利要求1所述室内模拟水华的稳定培养方法，其特征在于，所述泵气机构包括空气泵（53），所述空气泵通过管道与通气口（5）相连，所述空气泵上还设置有气体流量计（52），所述气体输送管上设置有空气过滤头（51）；所述光源单元包括沿所述反应釜的顶部及四围均布设置的led灯。

7.根据权利要求1所述室内模拟水华的稳定培养方法，其特征在于，所述硝酸盐为硝酸钠、硝酸钾、硝酸铵和硝酸钙中的一种或多种；所述磷酸盐为磷酸二氢钾、磷酸二氢钠、磷酸钠、磷酸氢钾中的一种或多种。