[发明专利]一种降解黄曲霉毒素B1

说明书

本发明属于微生物领域，尤其涉及一种降解黄曲霉毒素B₁的菌株及其应用。本发明的菌株具有高效降解黄曲霉毒素B₁的作用，将其应用于发霉花生粕中，发酵3‑4天，降解率可达到90％以上，脱毒的花生粕中黄曲霉毒素B₁含量低于国家限量标准。该菌株作为降解黄曲霉毒素B₁的生物材料，可开发成生物脱毒剂，对饲料、养殖工业具有很好的应用前景。

技术领域

本发明属于微生物领域，尤其涉及一种降解黄曲霉毒素B₁的菌株及其应用。

背景技术

黄曲霉毒素是一类主要由黄曲霉、寄生曲霉等曲霉产生的次级代谢产物，具有极强的致癌、致畸、致突变性。目前已鉴定出的黄曲霉毒素种类有20多种，其中黄曲霉毒素B₁(AFB₁)的毒性最强，1993年被国际癌症研究机构(International Agency for Researchon Cancer,IARC)归为一级致癌物。其危害的靶器官主要是肝脏，长期摄入会引起肝癌，并引发肾脏、胃肠器官的癌变。

花生粕是提取花生油后的副产品，蛋白质含量达48％，是我国重要的植物来源蛋白饲料。然而，花生粕在储存过程中极易污染黄曲霉毒素，在很大程度上限制了其在饲料领域的应用。我国饲料卫生标准(GB13078-2017)规定花生粕中黄曲霉毒素B₁的限量标准为≤50μg/kg。传统的去除花生粕中黄曲霉毒素的方法主要有物理法和化学法，包括吸附法、紫外线照射法、碱处理法、臭氧法、氨化法等，但都存在效果差、营养损失大、适口性差等缺点。近几年，生物脱毒法由于具有条件温和、提高产品营养和适口性好等特点逐渐得到业内广泛认可。

目前用于花生粕生物脱毒的微生物主要有乳酸菌、酵母菌、枯草芽孢杆菌等。乳酸菌和酵母菌主要通过菌体对毒素的吸附作用，使毒素在通过胃肠道时不被吸收，直接排出体外。这种吸附作用存在可逆性，在一定条件下会 解吸附，不是根本意义上的脱毒。枯草芽孢杆菌产生的酶对黄曲霉毒素有一定的降解作用，但是脱毒效果不稳定且发酵产物适口性差，很难大规模应用。

发明内容

本发明针对上述现有技术存在的不足，提供一种降解黄曲霉毒素B₁的菌株及其应用。

本发明解决上述技术问题的技术方案如下：

一种降解黄曲霉毒素B₁的菌株，其保藏编号为CGMCC No.17142。

本发明的第二个目的在于提供上述菌株CGMCC No.17142在降低发霉花生粕中黄曲霉毒素B₁的应用。

本发明的第三个目的在于提供上述菌株的分离方法，步骤如下：

(1)将采集自山东省莱阳市花生种植基地的土壤在无菌生理盐水中摇床震荡10-20min，制备菌悬液；其中，土壤与无菌生理盐水的用量比为10g：(80-120)mL；

(2)将步骤(1)的菌悬液用无菌生理盐水进行梯度稀释后，涂布在酵母膏胨葡萄糖琼脂培养基平板上，在35-40℃条件下培养24h；

(3)挑取平板上形态不同的单菌落，采用平板划线法纯化，纯化后的菌株采用黄曲霉毒素降解实验筛选，得到高效降解黄曲霉毒素B₁的菌株CGMCC No.17142。

其中，步骤(2)中所述的梯度稀释具体操作为：步骤(2)中所述的梯度稀释具体操作为：取步骤(1)的菌悬液静置5min，取上层清液1mL，用无菌生理盐水进行逐级稀释10^-1、10^-2、10^-3、10^-4、10^-5、10^-6，取不同稀释度的菌悬液，分别吸取100μL均匀涂布于培养基平板上。