[发明专利]一种绵羊支原体肺炎、鹦鹉热衣原体病的二联灭活疫苗及其制备方法

说明书

本发明公开了一种绵羊支原体肺炎、鹦鹉热衣原体病的二联灭活疫苗及其制备方法。该二联灭活疫苗的活性成分包括灭活的绵羊肺炎支原体和灭活的鹦鹉热衣原体的MOMP蛋白。鹦鹉热衣原体的MOMP蛋白的氨基酸序列如序列表中序列2所示。绵羊肺炎支原体为绵羊肺炎支原体(Mycoplasma ovipneumoniae)SH‑01CGMCC No.16503。实验证明，该的二联灭活疫苗免疫实验动物(如豚鼠、家兔、Beagle犬)和靶动物(如绵羊)均具有良好的安全性，并可以有效预防绵羊肺炎支原体和鹦鹉热衣原体感染实验动物和靶动物。对防控绵羊支原体肺炎和鹦鹉热衣原体病的流行和传播具有重要的实际意义。本发明具有重要的应用价值。

技术领域

本发明属于兽用生物制品领域，具体涉及一种绵羊支原体肺炎、鹦鹉热衣原体病二联灭活疫苗及其制备方法。

背景技术

绵羊感染肺炎及流产是严重危害畜牧业健康发展的重要因素，特别是近些年随着气候变化、生态环境破坏及抗生素滥用使得绵羊肺炎、流产发病率及死亡率逐年上升。由此，防控绵羊肺炎及流产已成为畜牧业健康发展及食品安全与人类健康急需解决的重大现实问题。

绵羊肺炎和流产是由多种原因所致，其最重要的是病原微生物感染，尤其是羊支原体和衣原体感染，且多以绵羊支原体感染致绵羊肺炎和鹦鹉热衣原体感染致怀孕绵羊流产为主。目前，国外使用的绵羊肺炎支原体疫苗有减毒疫苗和灭活疫苗，两种疫苗都有效，减毒疫苗的免疫保护效果与灭活疫苗相当，但存在活毒的安全性而不再使用，因而灭活疫苗成为主流。人们采用灭活及佐剂技术制备的鹦鹉热衣原体活疫苗免疫羊，证明其是安全、有效的，但需在鸡胚卵黄囊或相应的细胞上培养，生产周期相对较长，且规模化生产困难，由此疫苗生产受限。采用基因工程制备的基因工程亚单位疫苗在应用中也证明其是安全、有效的。从已有的研究及批准上市的疫苗可见，鹦鹉热衣原体灭活疫苗和重组鹦鹉热重组MOMP蛋白疫苗对绵羊均有良好的免疫保护性。在国内，军事医学科学院微生物流行病研究所研制的羊衣原体基因工程亚单位疫苗已批准上市，保护率可达80-100％。然而批准上市用于预防绵羊肺炎支原体、鹦鹉热衣原体单价灭活疫苗只有各自相应疫苗，而没有联苗。而肺炎一般在秋末、冬天和春天与配种怀孕期重叠，因此，将绵羊支原体感染致绵羊肺炎及鹦鹉热衣原体感染致怀孕绵羊流产的疫苗两者联合应用，研制绵羊支原体肺炎、鹦鹉热衣原体病二联灭活疫苗，用于预防绵羊肺炎支原体感染肺炎和鹦鹉热衣原体感染流产，达到一苗两用，具有重要的应用价值。

抗生素药物治疗很难彻底清除患绵羊体内绵羊支原体和鹦鹉热衣原体的感染，往往造成内源性的持续感染，而且长期使用抗生素类药物会导致耐药株的产生。大量长期的药物治疗还存在药物残留超标和对肉质的影响等问题，由此疫苗接种是预防羊支原体性肺炎的首选方法。

绵羊肺炎支原体(Movipneumoniae，Movi)可引起在绵羊中流行的接触性传染病。该病在夏末和秋季最为常见，以高热、咳嗽、喘气、渐进性消瘦，肺间质增生性炎症、胸和胸膜发生浆液性和纤维素性炎症为主要病征。该病目前在很多国家与地区广泛流行，包括中亚、北非、中东等养羊聚集地区，在我国由Movi引起的羊支原体肺炎普遍流行，对养羊业造成了严重危害。

鹦鹉热嗜衣原体(Chlamydophila psittaci，Cps)是一类专性细胞内寄生的人兽共患病病原体，属于衣原体科嗜衣原体属(Chlamydophila)。Cps对鸟类、家禽、家畜都有很强的感染性。CpS可感染130多种鸟类，感染后鸟类出现呼吸困难、情绪低落等症状，严重的可死亡。牛、羊以及其它哺乳动物感染Cps后，在临床上主要表现为呼吸困难、关节炎、结膜炎、发热、流产、死亡等特征，给畜牧业造成巨大的经济损失。我国也存在禽类鹦鹉热衣原体感染和畜类衣原体感染。一些从国外引种比较频繁的规模化畜禽场普遍存在8％～50％衣原体感染，发生过衣原体感染的畜禽养殖场中，感染动物群的流产率和死胎率远高于没有衣原体感染的养殖场。近年来也陆续报道了一些鹦鹉热衣原体导致羊繁殖障碍疾病，海伦市一些乡镇绵羊饲养场及大户的羊群不同程度地受到衣原体侵害，在临床上主要表现为发热、流产、死亡和产畸型羔、弱羔为特征，给养羊业造成严重经济损失。