[发明专利]一种生物表面活性功能蛋白的生产方法及其所用培养基

说明书

本发明公开了一种生物表面活性功能蛋白的生产方法及其所用培养基。本发明提供了真菌发酵培养基，含有0.1‑1g/L玉米浆、5‑20g/L蛋白胨和20‑40g/L乳糖(或乳清)。本发明培养基不仅可用于木霉中疏水蛋白的生产，也可用于木霉中其他蛋白质的生产。丝状真菌有相似的培养条件，故本发明提供的培养基同样适用于其他真菌中疏水蛋白或其他蛋白的表达。本发明发酵工艺简便，只需将孢子液接种至发酵培养基中即可，不需转接，原料较为廉价，成本大大降低，适合工业生产应用。

技术领域

本发明涉及微生物技术领域，具体涉及一种生物表面活性功能蛋白的生产方法及其所用培养基。

背景技术

培养基是供微生物、植物、动物组织生长发育的人工配制的养料。生长对培养基营养物质的配比和pH值有一定要求，如碳氮比对微生物生长的影响很大，酵母菌和霉菌通常在pH 4.5-6范围内生长。同一种微生物在不同培养基培条件下，所产生的细胞产物有很大差异，为实现微生物的不同功能一般会选择不同培养基。因此选择高效的培养基是微生物发酵工业的关键。

在微生物发酵工程技术领域，有很大一类微生物发酵所使用的发酵培养基含有一定数量的固体物，这类固体物一大部分来自生物产品原料，例如木霉培养基中常用固体纤维素培养。颗粒度较大的固型物存在的培养基对工业生产影响较大。纯液体高密度发酵是工业发酵的追求。

生物表面活性功能蛋白是小分子分泌蛋白，分子结构与表面活性剂功能区域非常相似，因此具有与表面活性剂相似的性质。表面活性剂依靠自身独特的两亲性结构而具有降低表面张力、起泡、乳化、分散、润湿、增溶、渗透和抗静电等性能，在各种工业和消费品应用中有重要的地位。目前，世界表面活性剂消耗量约为900万吨，其中工业用量占55％，已广泛应用于选煤、纺织、食品、材料制备、造纸、制药等工业领域。

丝状真菌木霉具有极强的合成和分泌蛋白的能力。木霉来源疏水蛋白是具有生物表面活性功能蛋白，其在工业、医药健康、食品方面具有广阔的应用前景。涂于玻璃表面可降低污染物吸附，对比化学涂料环境更友好。用于医疗器材表面，降低非特异性蛋白结合，降低微生物感染可能性。用于生物传感器中，可增加传感器表面蛋白稳定性，延长传感器有效期。用于医药领域，生物表面活性功能蛋白双亲性可包裹某些难溶于水的药物，增加药物可溶性。用于日化及化妆品行业，既可作为起泡剂，又可增加粘附性。

疏水蛋白生物表面活性功能的特性决定其具有很大的应用潜力，研究人员陆续在多种丝状真菌中发现有疏水蛋白的存在，里氏木霉来源疏水蛋白被证明具有极强的表面活性功能，但是天然生物表面活性功能蛋白的表达量低成为阻碍其应用的最大瓶颈。

发明内容

本发明的目的是提供一种生物表面活性功能蛋白的生产方法及其所用培养基。

本发明首先提供了菌发酵培养基，为真菌发酵培养基A或真菌发酵培养基B。

所述真菌发酵培养基A含有0.1-1g/L玉米浆、5-20g/L蛋白胨和20-40g/L乳糖。

所述真菌发酵培养基B含有0.1-1g/L玉米浆、5-20g/L蛋白胨和20-40g/L乳清。

所述真菌发酵培养基A含有1g/L玉米浆、5g/L蛋白胨和40g/L乳糖。

所述真菌发酵培养基B含有1g/L玉米浆、5g/L蛋白胨和40g/L乳清。

所述真菌发酵培养基A含有1g/L玉米浆、10g/L蛋白胨和40g/L乳糖。

所述真菌发酵培养基A含有1g/L玉米浆、20g/L蛋白胨和40g/L乳糖。

所述真菌发酵培养基A含有0.1g/L玉米浆、5g/L蛋白胨和40g/L乳糖。

所述真菌发酵培养基A含有0.5g/L玉米浆、5g/L蛋白胨和40g/L乳糖。