[发明专利]一种山羊支原体肺炎、鹦鹉热衣原体病的二联灭活疫苗及其制备方法

说明书

本发明公开了一种山羊支原体肺炎、鹦鹉热衣原体病的二联灭活疫苗及其制备方法。该二联灭活疫苗活性成分包括灭活的丝状支原体山羊亚种、灭活的绵羊肺炎支原体和灭活的鹦鹉热衣原体的MOMP蛋白。鹦鹉热衣原体的MOMP蛋白的氨基酸序列如序列表中序列2所示。绵羊肺炎支原体为绵羊肺炎支原体SH‑01CGMCC No.16503。丝状支原体山羊亚种为丝状支原体山羊亚种GT‑01CGMCC No.16504。实验证明，该二联灭活疫苗免疫实验动物和靶动物均具有良好的安全性，并可以有效预防山羊支原体肺炎和鹦鹉热衣原体感染实验动物和靶动物。对防控山羊支原体肺炎和鹦鹉热衣原体病的流行和传播具有重要意义。本发明具有重要应用价值。

技术领域

本发明属于兽用生物制品领域，具体涉及一种山羊支原体肺炎、鹦鹉热衣原体病二联灭活疫苗及其制备方法。

背景技术

山羊支原体性肺炎是由丝状支原体山羊亚种(Mycoplasmamycoidessubsp.capri，Mmc)和/或绵羊肺炎支原体(Mycoplasma ovipneumoniae，Movi)和/或山羊支原体山羊亚种(Mycoplasma capricolum subsp.capricolum，Mcc)引起的、在山羊和绵羊中普遍流行的接触性传染病。山羊支原体性肺炎在夏末和秋季最为常见，以高热、咳嗽、喘气、渐进性消瘦，肺间质增生性炎症、胸和胸膜发生楽液性和纤维素性炎症为主要病变特征，羊群一旦感染，感染率高。山羊支原体性肺炎目前广泛发生于很多国家与地区，包括中亚、北非、中东等养羊聚集地区。在我国，由Mmc和Movi引起的山羊支原体性肺炎普遍流行，对养羊业造成了严重危害。

近年来，国内外研究者认为，羊传染性胸膜肺炎类疾病的病原复杂，存在多种致病菌型。Mcc、Mmc和山羊支原体山羊肺炎亚种(Capricolum subsp.capripneumoniae，Mccp)是引起山羊传染性胸膜肺炎类疾病的病原体，它们同属于具有较高亲缘关系的丝状支原体Mycoplasmamycoidescluster(Mm Cluster)。Movi能引起绵羊和山羊的增生性、间质性和传染性胸膜肺炎。国内研究证实，Mmc和Movi两个致病菌型是广泛流行于我国很多地区山羊支原体性肺炎疾病的优势菌型。据邓光明等人(1991)研究，Mmc和Movi两类支原体在血清学方面不存在交叉反应。

Mmc是一种细小多形性的微生物，无细胞壁，革兰氏染色阴性。菌体呈球状、棒状、弧状、逗号状、梨状等多种形态，以球状最为常见。菌体较大，支原体菌体直径一般为125-500nm，而Mmc的直径为150-1250nm。Mmc在固体培养基上形成透明的小菌落，比其他支原体菌落稍大。低倍光学显微镜下，Mmc的大多数菌落呈典型的油煎蛋状，菌落中心凸起呈黄棕色乳头状。Movi也无细胞壁，革兰氏染色阴性。菌体呈高度的多形性，如小球形、椭圆形、丝状、棒状等形态，以小球形为常见。Movi在固体培养基上形成透明的细小针尖样菌落。在低倍光学显微镜下，Movi呈圆形隆起，桑葚样，无中心挤，不成煎蛋状。在自然状态下，Mmc只感染山羊，一般不感染绵羊；而Movi既可感染绵羊也可感染山羊，一般羔羊易感。冬末春初和秋末由于气温骤变，养殖密度较高的、尤其是舍饲圈养的羊群中，山羊支原体性肺炎较易发生和流行。该病呈地方性流行，病羊是主要的传染源，呼吸道的飞沫传染是其主要传播方式，新疫区的爆发几乎都是由于未经检疫的病羊的引进而发生的。该病传播速度较快，20天就可波及全群。

人们在致力于寻找防控山羊支原体性肺炎的有效方法。由于支原体本身的特点，用药物很难从羊体内清除病原，一旦停药，疾病还会复发。另一方面，由于抗菌素类药物的使用造成了产品中抗生素的残留，危害人类健康，所以疫苗接种是预防支原体病的首选方法。各国一般都根据本地具体流行情况针对性的研制适合于本地区的灭活疫苗进行免疫。流行于我国的丝状支原体山羊亚种和绵羊肺炎支原体之间缺乏交叉保护，且常会混合感染，同一种支原体也易发生变异而导致抗原差异。