[发明专利]黄曲霉OUCMDZ-2205次级代谢产物的用途

权利要求书

1.如下式结构所示的化合物，

其中，

所述化合物经由黄曲霉菌丝体在果酸和苯丙氨酸衍生物混合溶液中浸泡、丙酮浸提。

2.权利要求1所述化合物的制备方法，其特征在于：包括以下步骤：黄曲霉真菌OUCMDZ-2205先在PDA固体斜面培养基上26-29℃培养7-9天，再接种于发酵液中25-32℃发酵培养18-35天，发酵液过滤得到菌丝体破碎后用75-85％丙酮浸提2-3次，减压浓缩除去丙酮后用乙酸乙酯萃取2-3次，发酵上清液用等量乙酸乙酯萃取2-3次，合并所有乙酸乙酯相，减压浓缩得到粗浸膏。

3.权利要求2所述化合物的制备方法，其特征在于：所述黄曲霉真菌OUCMDZ-2205为从凡纳滨对虾中分离得到的。

4.权利要求2所述化合物的制备方法，其特征在于：所述黄曲霉OUCMDZ-2205菌株的获取方法为：将凡纳滨对虾样品依次用60-80％乙醇和无菌海水洗涤；经研钵捣碎，无菌水稀释，稀释液均匀涂布在马铃薯右旋糖上；采用PDA固体培养基26-29℃下培养7-9天；收集并纯化菌落。

5.权利要求2所述化合物的制备方法，其特征在于：所述黄曲霉OUCMDZ-2205发酵培养的方法为：

1)配制发酵液：所述发酵液组成为：每1L自来水中含有8-12g/L葡萄糖，18-22g/L麦芽糖，18-20g/L甘露醇，8-11g/L谷氨酸单钠，0.3-0.6g/L KH₂PO₄，0.1-0.5g/L MgSO₄·7H₂O，1-5g/L酵母抽提物和25-35g/L SEA盐；所述发酵液的pH为7；

2)发酵液灭菌；

3)将发酵液进行紫外照射10-15min；

4)将PDA固体培养基收集菌落转移至发酵液中培养：25-32℃，100％相对湿度下，培养18-35天。

6.权利要求2所述化合物的制备方法，其特征在于：所述发酵液过滤得菌丝体先在含有质量分数为1-2％乳糖酸和0.01-0.1％Fmoc-L-2-甲基苯丙氨酸的甲醇溶液中浸泡，然后进行组织破碎仪破碎，超声浸提。

7.权利要求2所述化合物的制备方法，其特征在于：将所述粗浸膏进硅胶VLC柱，逐步洗脱：采用石油醚-CH₂Cl₂和CH₂Cl₂-MeOH逐步洗脱得八个主要馏分：馏分1～8；所述馏分2经RP-18硅胶柱采用CH₂Cl₂-MeOH(95-102:1)洗脱、Sephadex LH-20(CH₂Cl₂-MeOH，1-2:1)进一步纯化得到馏分2.1和馏分2.2，所述馏分2.1用半制备的HPLC纯化，用85-95％MeOH-H₂O洗脱，得到目标化合物。

8.权利要求5所述化合物的制备方法，其特征在于：所述一同转入发酵液中的还有葡聚糖酶和虫草素，分别为发酵液质量分数的0.1-0.3％和0.02-0.05％。

9.权利要求1所述化合物的用途，其特征在于：该化合物对金黄色葡萄球菌、人乳腺癌细胞和A549细胞均具有抑制作用。

10.权利要求1所述化合物的用途，其特征在于：该化合物对金黄色葡萄球菌具有抗菌活性，其MIC值为20.5μm；对人乳腺癌细胞和A549细胞系具有微弱的细胞毒性，其IC₅₀的值为18-30μm；对蛋白激酶C具有抑制作用，其IC50值为15.6μm。