[发明专利]一株桃儿七的内生真菌及其应用

说明书

本发明提供了一株桃儿七内生真菌，粉红粘帚霉fhnzm(Clonostachys rosea)，保藏号CGMCC No.17070，保藏于中国普通微生物菌种保藏管理中心。该菌株能够提高桃儿七根中鬼臼毒素的含量，抑制桃儿七根的生长，抑制植物种子的萌发和胚根的伸长，能够作为核心菌株来生产用于促进桃儿七鬼臼毒素积累的菌剂，对于绿色防治桃儿七病虫害和提高人工栽培桃儿七的品质，有效提高桃儿七鬼臼毒素的积累具有重大意义。

技术领域

本发明涉及农业和工业生物技术领域，具体的是一株桃儿七的内生真菌及其应用。

背景技术

桃儿七(Sinopodophyllum hexandrum Royle)是小檗科桃儿七属草本植物，国家三级保护植物，主要分布在我国西部2800米以上的林缘及灌丛中。由于自然资源的匮乏和濒危，被收录入《中华珍稀濒危植物名录》和《中国植物红皮书》。

桃儿七在民间主要用于痛疖肿毒、风湿性骨痛、气管炎等症，现代药学研究表明，其根及根茎中主要含有木脂素类、黄酮类、皂苷、多糖等成分，其中木脂素类的鬼臼毒素含量最高。鬼臼毒素具有广泛的药学活性，如0.5％鬼臼毒素酊在治疗尖锐湿疣方面具有起效快、治愈率高、安全性好等特点，1990年世界卫生组织推荐其为一线药物，1994年我国《国家基本药物》皮肤类抗病毒唯一入选药物。鬼臼毒素还是合成抗癌药物GP7、VP-16、VM- 26、NK611等及抗艾滋病药物的前体物质。已应用于临床的VP-16和VM-26对小细胞肺癌、淋巴癌等多种肿瘤疾病均有很好的疗效。

由于鬼臼毒素类物质化学结构复杂，对其进行化学全合成的难度较大；基因工程学手段构建工程菌也由于参与形成该类物质的酶数量过多而无法进行。目前，鬼臼毒素的来源主要是通过採挖野生桃儿七，从其根和根茎中提取。近年来，随着野生资源的锐减及封山育林等生态保护政策的实施，野生资源已经很难获取。提高桃儿七种植海拔可以有效提高其品质，但产量低、农事操作困难、对生态环境破坏严重，事实上，在高海拔区域(如：2800米以上)人工种植很难实施。桃儿七人工驯化栽培已有很多报道，但栽培周期长、产量低、药材收购价格低，农民没有种植的积极性。通过桃儿七组培苗胚根及愈伤组织生产鬼臼毒素有零星报道，但难以放大培养，鬼臼毒素含量低等问题限制了推广应用。通过桃儿七内生菌生产鬼臼毒素已有报道，虽然容易放大培养，但是通过内生菌发酵生产鬼臼毒素存在含量低、菌种稳定性差、随着菌种的传代生产鬼臼毒素的能力丧失等问题。因此，提高桃儿七鬼臼毒素含量问题亟待解决。

发明内容

本发明的目的是提供一种可克服现有技术不足的技术方案，即提供一株桃儿七的内生真菌及其应用。

本发明的目的一是提供一株桃儿七内生真菌粉红粘帚霉fhnzm(Clonostachysrosea)，其保藏号为CGMCC No.17070，保藏于中国普通微生物菌种保藏管理中心。

本发明的目的二是提供fhnzm的培养方法，具体步骤如下：

无菌环境下挑取fhnzm菌丝接入马铃薯葡萄糖液体培养基中，温度27-30℃，转速120- 160rpm，发酵时间7-10天。

马铃薯葡萄糖液体培养基配方如下：马铃薯200g，放入水中煮沸30分钟，用双层纱布过滤，取其滤液加20g葡萄糖，补足水至1L，自然PH。

作为优选，所述发酵条件为温度30℃，转速160rpm，发酵时间9天。

本发明的目的三是提供fhnzm的用途，具体内容如下：

(1)抑制桃儿七生长，尤其是根的伸长；

(2)抑制其他经济作物种子的萌发和胚根的伸长，降低种子的发芽指数，可用于开发种苗的生长抑制剂，起到蹲苗、壮苗并且防治病虫害的作用；

(3)促进桃儿七鬼臼毒素的积累，提高桃儿七根中鬼臼毒素含量，包括组织培养的桃儿七器官和自然生长的桃儿七植株。