[发明专利]一种羟基喜树碱类衍生物脂质体的制备方法

说明书

本发明涉及一种羟基喜树碱类衍生物脂质体的制备方法。所述脂质体原料质量配比如下：羟基喜树碱衍生物1份，蛋黄卵磷脂5～15份，胆固醇3～6份、维生素E 0.5～2份，Tween‑80 1～5份，所述方法包括薄膜分散、高压均质和冷冻干燥等步骤。本发明使用无水乙醇替代传统有机溶剂，联用薄膜分散法和高压均质法，并就均质压力、均值温度和均质次数三个主要的工艺参数进行优化，制备得到粒度小、粒径均一、稳定性好的羟基喜树碱类衍生物脂质体。

(一)技术领域

本发明涉及一种羟基喜树碱类衍生物脂质体的制备方法，属于医药制剂领域。

(二)背景技术

7-乙基-10-羟基喜树碱(7-Ethyl-10-hydroxycamptothecin，SN-38)是广谱抗肿瘤药物伊立替康(Irinotecan，CPT-11)的活性代谢产物，可用于结直肠癌、肝癌、肺癌和乳腺癌等恶性肿瘤的治疗。SN-38是一种拓扑异构酶I抑制剂，可与拓扑异构酶I及DNA形成三元复合物并引起DNA单链断裂，从而阻断DNA复制，引起细胞凋亡，达到抑瘤的目的。据报道，市售CPT-11在患者体内的转化率小于10％，且存在个体差异性，而SN-38作为CPT-11的活性代谢产物，其抗肿瘤活性约为CPT-11的100～1000倍。但由于SN-38的水溶性极差，生物利用度低，限制了其在抗肿瘤治疗方面的广泛应用，目前还没有SN-38制剂上市。

在一定温度下，根据Ostwald-Freundlich方程可知，难溶性药物的溶解度随粒径的减小而增大；根据Noyes-Whitney方程可知，药物的溶出速度随药物的表面积的增大而增大。理论上，减小药物粒径有利于难溶性药物疗效的发挥。脂质体是近年来研究较多的一种剂型，脂质体本身对人体无毒性，不会引起免疫反应，且药物在脂质体中的包封率高，受环境因素影响小，有利于保持SN-38内酯环的稳定性。现有报道中脂质体的制备方法多样，包括薄膜分散法、溶剂注入法、超声波分散法、冷冻干燥法、逆向蒸发法等，但单一的传统方法存在粒径大、分布不均等弊端，且制备过程通常选用二氯甲烷、三氯甲烷、甲醇或其混合体系等毒性较大的有机溶剂。

(三)发明内容

本发明的目的在于提供一种制备方法简单、经济、绿色，适合大规模生产的同时，又能得到质量较好的载药脂质体的羟基喜树碱类衍生物脂质体的制备方法。

本发明采用的技术方案是：

一种羟基喜树碱类衍生物脂质体的制备方法，其原料质量配比如下：羟基喜树碱衍生物1份，蛋黄卵磷脂5～15份，胆固醇3～6份、维生素E 0.5～2份，Tween-80 1～5份，所述方法包括：

(1)称取处方量的羟基喜树碱衍生物、蛋黄卵磷脂、胆固醇、维生素E和Tween-80于圆底烧瓶中，加入足量无水乙醇，20～30℃超声至完全溶解；保持水温40～50℃，于旋转蒸发仪上缓慢减压旋蒸，至溶剂完全挥发后，置于真空干燥箱过夜以完全除去有机溶剂，形成均匀透明的脂质薄膜，加入适量PBS缓冲液水合薄膜20～30分钟，得脂质体混悬液；

(2)使用高压均质仪对步骤(1)所得脂质体混悬液进行均质改性，均质温度为10～20℃，均质压力为200～1200bar，均质次数为5～30次；(3)高压均质后的脂质体混悬液经聚偏氟乙烯膜过滤后，冷冻干燥，得所述羟基喜树碱类衍生物脂质体。

本发明使用无水乙醇替代传统有机溶剂，联用薄膜分散法和高压均质法，并就均质压力、均值温度和均质次数三个主要的工艺参数进行优化，制备得到粒度小、粒径均一、稳定性好的羟基喜树碱类衍生物脂质体。

优选的，步骤(2)均质温度为20℃，均质压力为800～1200bar，均质次数为15～20次。

所述羟基喜树碱衍生物优选为7-乙基-10-羟基喜树碱。

制备所述羟基喜树碱类衍生物纳米粒的原料质量配比优选如下：7-乙基-10-羟基喜树碱1份，蛋黄卵磷脂10份，胆固醇5份、维生素E 1份，Tween-80 2份。