[发明专利]人源抗HIVgp120特异性抗体Z166及其应用方法

权利要求书

1.人源抗HIV gp120特异性抗体Z166，其特征在于它是采用噬菌体展示技术，利用抗体特异性引物扩增抗体基因可变区片段，利用基因工程技术构建真核IgG表达载体，利用细胞工程技术通过瞬时转染和抗体纯化技术获得的；所述抗体轻链可变区核苷酸序列含有如下所示的核苷酸序列，或含有如下所示的核苷酸序列经替换、删除或添加一个或几个碱基形成的具有同等功能的核苷酸序列；

Z166抗体轻链序列

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其重链可变区核苷酸序列含有如下所示的核苷酸序列，或含有如下所示的核苷酸序列经替换、删除或添加一个或几个碱基形成的具有同等功能的核苷酸序列；

Z166抗体重链序列

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2.如权利要求1所述的人源抗HIV gp120特异性抗体Z166，其特征在于所述人源HIVgp120特异性抗体轻链核苷酸序列在不改变氨基酸序列的条件下，对可变区的基因序列进行改造，获得编码具有相同功能的抗体的基因；或根据表达抗体宿主的密码子偏好性，人工合成改造基因，以提高抗体的表达效率。

3.如权利要求2所述的人源抗HIV gp120特异性抗体Z166，其特征在于所述抗体的轻链可变区和重链可变区可经过重组以形成较小分子量的Fab抗体或更小分子量的单链抗体Tab抗体和单链抗体同样具有识别HIV表面抗原的特性，小分子量的抗体具有穿透力强、易进入局部组织或细胞内发挥作用，可将上述编码Fab抗体的基因、SCFV抗体的基因克隆到表达载体，进而转化宿主，通过诱导表达获得Fab抗体和单链抗体SCFV。

4.如权利要求2所述的人源抗HIV gp120特异性抗体Z166，其特征在于所述人源HIVgp120特异性抗体，为单链抗体、Fab抗体、微型抗体、嵌合抗体或全抗体免疫球蛋白IgGI、IgG2、IgG4、IgA、IgE、IgM或IgD。

5.如权利要求1所述的人源抗HIV gp120特异性抗体Z166在制备治疗或预防HIV感染的疾病药物中的应用方法，其特征包括：一是将所述人源HIV gp120特异性抗体应用在制备HIV感染的治疗药物中，具体的做法是：利用上述获得的人源中和性HIV基因工程抗体可变区基因，以Fab抗体、单链抗体基因及全长IgG抗体的形式，在原核细胞、真核细胞(包括酵母细胞)及任何重组蛋白表达系统中表达和生产该抗体；或以上述可变区基因为基础改造后的含有该抗体基因的任何其他基因，获得具有高亲和力特异性识别HIV，中和HIV病毒，并能介导杀伤HIV病毒感染细胞的抗体产物，用以开发HIV抗原快速检测试剂盒，或制成临床上用于预防和治疗由HIV引起的疾病的抗体药物；二是将上述人源HIV gp120特异性抗体Z166用于检测病毒，作为潜在的HIV病毒检测试剂，具体做法是：利用SDS-PAGE、ELISA、体外病毒中和实验、抗体依赖细胞介导的细胞毒性杀伤实验方法对获得的IgG抗体Z166进行功能鉴定，结果表明表达纯化的人源IgG抗体Z166分子量大小符合预期；所述抗体可以高效结合HIV包膜蛋白gp120，其针对HIV-1病毒亚型BAL包膜蛋白gp120亲和力的EC₅₀低于0.02μg/ml，其针对HIV-1病毒亚型包膜蛋白YU2的亲和力EC₅₀低于0.06μg/ml。