[发明专利]类芽孢杆菌及其生物防治制剂的制备方法

说明书

本发明涉及一种类芽孢杆菌及其生物防治制剂的制备方法，属于微生物领域。其分类学名为：类芽孢杆菌Paenibacillus tyrfisKXJ51，已保藏于中国普通微生物菌种保藏管理中心，保藏编号为：CGMCC No.17155，保藏日期为2019年1月10日。类芽孢杆菌制备生物防治制剂的方法，包括菌株活化、液体种子制备和液体发酵。类芽孢杆菌Paenibacillus tyrfisKXJ51在防治植物病原菌中应用。本发明的有益效果是：类芽孢杆菌菌株KXJ51生长速度快、发酵密度高，作用谱广可防治多种植物病害、遗传稳定性强，与环境兼容性好、防病持效期长。

技术领域

本发明涉及一种类芽孢杆菌及其生物防治制剂的制备方法，属于微生物领域。

背景技术

植物病害是寄主植物和病原物的拮抗性共生，其发生和流行是寄主植物和病原物相互作用的结果。农作物和林木发生病害，常使国家经济和人民生活遭受严重损失。近年来，随着公众对食品和环境中化学农药安全性的普遍关注，以及一些危险性化学农药的禁用，促使人们寻求其它安全有效的植物病害控制新途径，利用有益微生物防治植物病害日趋受到重视。它是向被打破了的植物自然生态系中引入对植物有益的外源拮抗菌、或通过调节环境促使自然的有益微生物群体增长并表现生防活性，通过微生物之间的相互作用达到防病之目的。而现有的一些微生物制成的生物制剂虽然可以在一定程度上达到防病的效果，但是远远不能达到人们想要的理想状态。

类芽孢杆菌属(Paenibacillus)是芽孢杆菌属分类上的新发展，类芽孢杆菌属的菌株具有芽孢杆菌属菌株的某些共性，不仅具有显著的生防潜力，还能产生耐热抗逆的芽孢，有利于生防菌剂的生产、剂型加工及在环境中存活、定殖与繁殖，是植物病害生防微生物的重要组成部分。由于类芽孢杆菌属细菌生长快、营养简单、能够形成具有较强抗逆能力的芽孢、在产品开发中较非芽孢杆菌属细菌有效活菌数量高、性能稳定，因而备受瞩目，是芽孢杆菌中比较具有应用潜力的菌种之一。

发明内容

本发明针对上述现有化学防治技术中存在的不足，提供一种类芽孢杆菌及其生物防治制剂的制备方法。

本发明解决上述技术问题的技术方案如下：

一种类芽孢杆菌，其分类学名为：类芽孢杆菌Paenibacillus tyrfisKXJ51，已保藏于中国普通微生物菌种保藏管理中心，保藏编号为：CGMCC No.17155，保藏日期为2019年1月10日。

类芽孢杆菌制备生物防治制剂的方法，包括以下步骤：

步骤一：菌株活化，挑取菌种划线接种至固体斜面培养基，于恒温培养箱内培养，待斜面长满菌落用于转接液体种子；

步骤二：液体种子制备，挑取活化菌株接种于装有种子培养基的容器中，八层纱布封口，于20℃-37℃、150r/min～240r/min摇床振荡培养24h～48h，长出菌体细胞，得液体种子；

步骤三：液体发酵，按体积比5～20％接种量向发酵培养基接入步骤二中制备的液体种子，转速300r/min～800r/min，溶氧控制20％，pH6.0～7.5，温度20～37℃，10L发酵罐通气培养24～56h。

优选地，述恒温培养箱内的温度为20℃～37℃，恒温培养箱内培养时间为1～2天。

优选地，所述的固体斜面培养基的溶质组分为：葡萄糖2g/L，酵母浸粉5g/L，蛋白胨10g/L，NaCl 5g/L，琼脂20g/L，pH7.0，121℃高压蒸汽灭菌20min。

优选地，所述的种子培养基的溶质组分为：葡萄糖10g/L，酵母浸粉5g/L，蛋白胨10g/L，KH₂PO₄ 1g/L，MgSO₄ 0.5g/L，玉米浆10g/L，pH7.0，121℃高压蒸汽灭菌20min。