[发明专利]一种茶渣可溶性膳食纤维重金属吸附剂的制备方法及其应用

权利要求书

1.一种茶渣可溶性膳食纤维重金属吸附剂的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：

(1)菌种活化：将绿色木霉菌种用0.5ml的无菌水溶解，接种到PDA培养基中，28℃培养72～96h，经过2～3次传代培养，备用；

(2)制备种子液：利用无菌水冲洗步骤(1)得到的PDA培养基制备孢子液，稀释至孢子浓度约为10⁷～10⁸cfu/mL，接种孢子液5ml于装有50ml的种子培养基中，在转速150r/min，28℃的摇床中震荡培养72h；

(3)配制发酵培养基：在锥形瓶中，加入K₂HPO₄ 2.0g、MgSO₄·7H₂O 0.3g、CaCl₂ 0.3g、CMC-Na 10g、蛋白胨0.5g、FeSO₄﹒7H₂O 0.0015g、MnSO₄·H₂O 0.0016g、ZnSO₄﹒7H₂O 0.0015g、CoCl₂﹒6H₂O 0.002g，用超纯水定容至1000mL，加入茶渣，调节pH值，在121℃下高压蒸汽灭菌30min；

(4)接种发酵：将步骤(2)得到的种子液按一定的接种量接到发酵培养基中，28℃震荡培养一段时间；

(5)制备茶渣可溶性膳食纤维：将步骤(4)得到的发酵液加入耐高温α-淀粉酶酶解30min，加入木瓜蛋白酶酶解10min，沸水浴10min灭酶活，离心取上清液，醇沉，离心，冷冻干燥后保存，得到茶渣可溶性膳食纤维吸附剂。

2.根据根据权利要求1所述的一种茶渣可溶性膳食纤维重金属吸附剂的制备方法，其特征在于：所述步骤(5)中，耐高温α-淀粉酶的酶活为2.0×10⁵U/g，酶添加量为1％，酶解温度为95℃，酶解pH为6.5；木瓜蛋白酶的酶活为5.0×10⁴U/g，酶添加量为0.5％，酶解温度为65℃，酶解pH为6.5。

3.根据根据权利要求1所述的一种茶渣可溶性膳食纤维重金属吸附剂的制备方法，其特征在于：所述步骤(4)中培养时间为43h，种子液接种量为10.5％。

4.根据根据权利要求1所述的一种茶渣可溶性膳食纤维重金属吸附剂的制备方法，其特征在于：所述步骤(3)中加入的茶渣与溶液的质量比为1：20，且茶渣是经预处理过的，其预处理步骤为：

(1)将茶渣原料粉碎，过100目标准筛，得到粗茶渣粉；

(2)高压均质处理：将10质量份的茶渣与1000质量份的水充分混合，在压力40MPa，物料温度35℃下，高压均质机均质20min，重复两次，冷冻干燥，获得改性茶渣原料。

5.根据根据权利要求1所述的一种茶渣可溶性膳食纤维重金属吸附剂的制备方法，其特征在于：所述步骤(3)中的pH值为5.5。

6.根据根据权利要求1所述的一种茶渣可溶性膳食纤维重金属吸附剂的制备方法，其特征在于：所述步骤(2)中的种子培养基的制备，包括如下步骤：在锥形瓶中，加入NaNO₃2.0g、K₂HPO₄ 1.0g、KCl 0.5g、MgSO₄﹒7H₂O 0.5g、FeSO₄0.01g、蔗糖30.0g、琼脂20.0g，用超纯水定容至1000mL，自然pH值，在121℃下高压蒸汽灭菌30min。

7.根据根据权利要求1所述的一种茶渣可溶性膳食纤维重金属吸附剂的制备方法，其特征在于：所述步骤(1)中的PDA培养基的制备，包括步骤如下：在锥形瓶中，加入PDA39.0g、KH₂PO₄ 3.0g、MgSO₄﹒7H₂O 1.5g、硫胺素8mg，用超纯水定容至1000mL，在121℃下高压蒸汽灭菌30min。

8.一种茶渣可溶性膳食纤维重金属吸附剂的应用，其特征在于：将如权利要求1-7任意一种所述的茶渣可溶性膳食纤维重金属吸附剂的制备方法制备的获得物作为重金属吸附剂，除去食品中含有镉、铅、铜在内的重金属。