[发明专利]一种去甲睾酮人工抗原的合成方法有效
申请号: | 201910288482.8 | 申请日: | 2019-04-11 |
公开(公告)号: | CN110128529B | 公开(公告)日: | 2023-07-07 |
发明(设计)人: | 梁剑平;周翔;刘宇;宋天增;梁妍;郝宝成;王学红;郭文柱;赵凤舞;杨珍;贾忠;张新刚;陶蕾 | 申请(专利权)人: | 中国农业科学院兰州畜牧与兽药研究所 |
主分类号: | C07K14/765 | 分类号: | C07K14/765;C07K1/107 |
代理公司: | 北京中恒高博知识产权代理有限公司 11249 | 代理人: | 高松 |
地址: | 730050 甘肃*** | 国省代码: | 甘肃;62 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 睾酮 人工 抗原 合成 方法 | ||
1.一种去甲睾酮人工抗原的合成方法,其特征在于,所述方法包括如下步骤:
(1)凹凸棒-纳米氧化铁粉的制备
通过凹凸棒土的提纯、凹凸棒活化及与纳米氧化铁粉混合制得;
(2)溶液1的制备
将19–去甲睾酮半抗原用N,N–二甲基甲酰胺搅拌溶解后,加入步骤(1)得到的凹凸棒-纳米氧化铁粉,得溶液1;
(3)溶液2的制备
将牛血清白蛋白溶解于PBS中,调节pH值,并加入N,N–二甲基甲酰胺,搅拌溶解得溶液2;
(4)反应
将步骤(2)得到的溶液1滴加入步骤(3)得到的溶液2中,进行避光振荡反应,反应完成后先用蒸馏水透析,再用PBS透析,紫外扫描透析液无小分子吸收峰时进行分装,冷藏,即得。
2.根据权利要求1所述的去甲睾酮人工抗原的合成方法,其特征在于,步骤(1)中,所述纳米氧化铁粉与活化后的凹凸棒土按重量比1:1混合,在固体混合机上进行0.5h。
3.根据权利要求1所述的去甲睾酮人工抗原的合成方法,其特征在于,步骤(2)中,所述19–去甲睾酮半抗原与N,N–二甲基甲酰胺的质量体积比为1:40g/mL,所述19–去甲睾酮半抗原与凹凸棒-纳米氧化铁粉的重量比为1:10-80。
4.根据权利要求3所述的去甲睾酮人工抗原的合成方法,其特征在于,所述19–去甲睾酮半抗原与凹凸棒-纳米氧化铁粉的重量比为1:60。
5.根据权利要求1所述的去甲睾酮人工抗原的合成方法,其特征在于,步骤(3)中,所述牛血清白蛋白与BSA的质量体积比为33:1mg/mL,pH值调节至8.5,所述牛血清白蛋白与N,N–二甲基甲酰胺的质量体积比为33:1mg/mL,搅拌在4℃下搅拌1h。
6.根据权利要求1所述的去甲睾酮人工抗原的合成方法,其特征在于,步骤(4)中,振荡反应再1-5℃下进行,反应时间为1-5h,优选为4h,蒸馏水透析时间为2d,PBS透析时间为3d,冷藏温度为-20℃。
7.根据权利要求6所述的去甲睾酮人工抗原的合成方法,其特征在于,在所述步骤(4)中,振荡反应的温度为4℃。
8.根据权利要求1所述的去甲睾酮人工抗原的合成方法,其特征在于,所述去甲睾酮人工抗原具有下面的结构式:
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