[发明专利]一种去甲睾酮人工抗原的合成方法有效

专利信息
申请号: 201910288482.8 申请日: 2019-04-11
公开(公告)号: CN110128529B 公开(公告)日: 2023-07-07
发明(设计)人: 梁剑平;周翔;刘宇;宋天增;梁妍;郝宝成;王学红;郭文柱;赵凤舞;杨珍;贾忠;张新刚;陶蕾 申请(专利权)人: 中国农业科学院兰州畜牧与兽药研究所
主分类号: C07K14/765 分类号: C07K14/765;C07K1/107
代理公司: 北京中恒高博知识产权代理有限公司 11249 代理人: 高松
地址: 730050 甘肃*** 国省代码: 甘肃;62
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摘要:
搜索关键词: 一种 睾酮 人工 抗原 合成 方法
【权利要求书】:

1.一种去甲睾酮人工抗原的合成方法,其特征在于,所述方法包括如下步骤:

(1)凹凸棒-纳米氧化铁粉的制备

通过凹凸棒土的提纯、凹凸棒活化及与纳米氧化铁粉混合制得;

(2)溶液1的制备

将19–去甲睾酮半抗原用N,N–二甲基甲酰胺搅拌溶解后,加入步骤(1)得到的凹凸棒-纳米氧化铁粉,得溶液1;

(3)溶液2的制备

将牛血清白蛋白溶解于PBS中,调节pH值,并加入N,N–二甲基甲酰胺,搅拌溶解得溶液2;

(4)反应

将步骤(2)得到的溶液1滴加入步骤(3)得到的溶液2中,进行避光振荡反应,反应完成后先用蒸馏水透析,再用PBS透析,紫外扫描透析液无小分子吸收峰时进行分装,冷藏,即得。

2.根据权利要求1所述的去甲睾酮人工抗原的合成方法,其特征在于,步骤(1)中,所述纳米氧化铁粉与活化后的凹凸棒土按重量比1:1混合,在固体混合机上进行0.5h。

3.根据权利要求1所述的去甲睾酮人工抗原的合成方法,其特征在于,步骤(2)中,所述19–去甲睾酮半抗原与N,N–二甲基甲酰胺的质量体积比为1:40g/mL,所述19–去甲睾酮半抗原与凹凸棒-纳米氧化铁粉的重量比为1:10-80。

4.根据权利要求3所述的去甲睾酮人工抗原的合成方法,其特征在于,所述19–去甲睾酮半抗原与凹凸棒-纳米氧化铁粉的重量比为1:60。

5.根据权利要求1所述的去甲睾酮人工抗原的合成方法,其特征在于,步骤(3)中,所述牛血清白蛋白与BSA的质量体积比为33:1mg/mL,pH值调节至8.5,所述牛血清白蛋白与N,N–二甲基甲酰胺的质量体积比为33:1mg/mL,搅拌在4℃下搅拌1h。

6.根据权利要求1所述的去甲睾酮人工抗原的合成方法,其特征在于,步骤(4)中,振荡反应再1-5℃下进行,反应时间为1-5h,优选为4h,蒸馏水透析时间为2d,PBS透析时间为3d,冷藏温度为-20℃。

7.根据权利要求6所述的去甲睾酮人工抗原的合成方法,其特征在于,在所述步骤(4)中,振荡反应的温度为4℃。

8.根据权利要求1所述的去甲睾酮人工抗原的合成方法,其特征在于,所述去甲睾酮人工抗原具有下面的结构式:

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