[发明专利]可注射型组织工程骨修复材料及其构建方法在审
| 申请号： | 201910289086.7 | 申请日： | 2019-04-11 |
| 公开（公告）号： | CN109908404A | 公开（公告）日： | 2019-06-21 |
| 发明（设计）人： | 刘玉侃;蔡玉荣 | 申请（专利权）人： | 杭州淡滨尼生物科技有限公司 |
| 主分类号： | A61L27/52 | 分类号： | A61L27/52;A61L27/20;A61L27/22;A61L27/38 |
| 代理公司： | 杭州裕阳联合专利代理有限公司 33289 | 代理人： | 姚宇吉 |
| 地址： | 310000 浙江省杭州市江干区杭州经*** | 国省代码： | 浙江;33 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 种子细胞 组织工程骨 可注射型 修复材料 凝胶载体 单个细胞 构建 微球 纤维蛋白原混合物 骨髓基质干细胞 耐缺氧能力 成骨能力 海藻酸钠 三维结构 生理活性 复合体 骨组织 注射性 附着 接种 复合 细胞 申请 | ||
1.一种可注射型组织工程骨修复材料，包括凝胶载体和种子细胞，种子细胞附着于凝胶载体上，形成具有骨组织三维结构和生理活性的复合体，其特征在于，以可注射性的海藻酸钠和纤维蛋白原混合物作为凝胶载体，凝胶载体用于复合种子细胞；所述种子细胞为骨髓基质干细胞微球。
2.如权利要求1所述的可注射型组织工程骨修复材料，其特征在于，所述的可注射性的海藻酸钠和纤维蛋白原混合物为质量浓度为0.1％-4％的海藻酸钠和浓度为5-30mg/ml的纤维蛋白原以体积比1:3混合形成的。
3.如权利要求1所述的可注射型组织工程骨修复材料，其特征在于，所述骨髓基质干细胞微球为细胞密度为108数量级的细胞微球。
4.一种可注射型组织工程骨修复材料的构建方法，其特征在于，包括以下步骤：
(1)培养种子细胞，种子细胞为骨髓基质干细胞微球；
(2)构建可注射性凝胶载体，以可注射性的海藻酸钠和纤维蛋白原混合物进行混合形成凝胶载体；
(3)复合种子细胞与凝胶载体，将种子细胞附着于凝胶载体以形成具有骨组织三维结构和生理活性的复合体。
5.如权利要求4所述的可注射型组织工程骨修复材料的构建方法，其特征在于，步骤(1)中，种子细胞为细胞密度为108数量级的骨髓基质干细胞微球。
6.如权利要求5所述的可注射型组织工程骨修复材料的构建方法，其特征在于，将细胞密度为6×105/ml的骨髓基质干细胞悬液置于旋转培养瓶中，转速为60转/分钟，旋转培养72小时后收集细胞密度为108数量级的骨髓基质干细胞微球。
7.如权利要求4所述的可注射型组织工程骨修复材料的构建方法，其特征在于，步骤(2)中，将质量浓度为0.1％-4％的海藻酸钠和浓度为5-30mg/ml的纤维蛋白原以体积比1:3混合形成凝胶载体。
8.如权利要求4所述的可注射型组织工程骨修复材料的构建方法，其特征在于，步骤(3)中，将种子细胞、磷酸钙和细胞因子加入到可注射性凝胶载体中，再灌装入1号注射器中；将凝血酶和氯化钙以体积比2:1混合装入2号注射器中，其中，凝血酶浓度为20-1000U/ml，氯化钙浓度为0.2％-3％；将1号注射器和2号注射器通过医用三通连接，将1号注射器中的混合物通过医用三通推注到2号注射器中进行混合，再将2号注射器中的混合物通过医用三通推注到1号注射器中，实现混合固化与灌装，获得可注射型组织工程骨修复材料。
9.如权利要求8所述的可注射型组织工程骨修复材料的构建方法，其特征在于，细胞因子为BMP-2、BMP-6和TGFβ3组合形成，其中，BMP-2浓度为1-200ug/ml，BMP-6浓度为1-200ug/ml，TGFβ3浓度为1-200ug/ml。
10.如权利要求9所述的可注射型组织工程骨修复材料的构建方法，其特征在于，BMP-2浓度为20μg/ml，BMP-6浓度为20μg/ml，TGFβ3浓度为20μg/ml。
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