[发明专利]酶联免疫试验用底物液、显色剂和终止液的检验方法在审

专利信息
申请号: 201910289154.X 申请日: 2019-04-11
公开(公告)号: CN109975539A 公开(公告)日: 2019-07-05
发明(设计)人: 韩文斌;张金蕊;刘利晶;陈静;李彬 申请(专利权)人: 郑州安图生物工程股份有限公司
主分类号: G01N33/535 分类号: G01N33/535;G01N21/78
代理公司: 郑州异开专利事务所(普通合伙) 41114 代理人: 王霞
地址: 450016 河南省郑州*** 国省代码: 河南;41
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摘要:
搜索关键词: 底物液 显色剂 终止液 检验 酶联免疫试验 检验结果 酶联免疫 人力物力 外观检查 试剂盒 清晰 节约 观察 检查
【权利要求书】:

1.一种酶联免疫试验用底物液、显色剂和终止液的检验方法,其特征在于:包括下述具体步骤:

第一步,肉眼观察底物液、显色剂、终止液溶液外观,应为无色透明的澄清液体;

第二步,取酶免抗-HIV酶结合物,用β2-MG样品稀释液稀释成不同的3个浓度梯度,浓度从低到高分别定义为Q1、Q2、Q3;

第三步,分别取10ul第二步稀释好的Q1、Q2、Q3依次加入到空白酶标板中,然后每孔加入50ul底物液和50ul显色剂,震荡混匀后在37℃电热恒温培养箱中避光温育10分钟,然后每孔加入50ul终止液,震荡混匀后随即在酶标仪上使用450nm波长读数,放置30min后再次读数;

第四步,将第三步中读过数的包被板贴上板贴,放置在室温环境下过夜后,观察空白孔,应无色、无沉淀;

第五步,取第三步酶标仪0min和30min读取的待检试剂的OD值,分别计算Q1、Q2、Q3的均值,其均值应分别在0.5±0.2、1.0±0.2、2.0±0.2的范围内,并且计算变异应≤8%;

第六步,取第三步酶标仪0min和30min读取的待检和对照的OD值,计算Q1、Q2、Q3的均值,其均值应分别在0.5±0.2、1.0±0.2、2.0±0.2的范围内,并且计算变异应≤12%;

第七步,取第三步酶标仪0min和30min读取的待检的OD值,分别计算Q1、Q2、Q3的均值,不同时间OD值的变化幅度应≤15%。

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