[发明专利]陆地棉基因组的精确高效编辑方法有效
| 申请号： | 201910290886.0 | 申请日： | 2019-04-11 |
| 公开（公告）号： | CN110283840B | 公开（公告）日： | 2021-04-13 |
| 发明（设计）人： | 金双侠;李波;芮杭萍;李亚军;王琼琼;张献龙 | 申请（专利权）人： | 华中农业大学 |
| 主分类号： | C12N15/82 | 分类号： | C12N15/82;C12N15/66 |
| 代理公司： | 武汉宇晨专利事务所 42001 | 代理人： | 张红兵 |
| 地址： | 430070 湖*** | 国省代码： | 湖北;42 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 陆地棉 基因组 精确 高效 编辑 方法 | ||
【权利要求书】：
1.一种转化载体GhRBE3在陆地棉基因编辑中的应用，其特征在于，所述转化载体GhRBE3的核苷酸序列如SEQ ID NO:3所示。
2.一种适用于陆地棉基因组编辑的如权利要求1中所述转化载体GhRBE3的制备方法，其特征在于，所述制备方法的步骤为：
（1）获得目的序列LbCpf1-NLS-3xHA，其核苷酸序列如序列表SEQ ID NO：4所示，该目的序列通过以下步骤制备获得：
1）在SEQ ID NO：2所示序列的pHUN611载体上设计引物，所述引物的序列如下所示：
正向引物：AAAAAGCAGGCTTCGAAATGTCCAAGCTGGAGAAGTTTACA，
反向引物为：GAAAGCTGGGTCTAGATTAGGCATAGTCGGGGACATC；
2）以pHUN611载体为模板，进行PCR扩增，获得LbCpf1-NLS-3xHA目的序列，该目的序列如SEQ ID NO：4所示；
（2）利用
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