[发明专利]一种非疾病诊断目的的人体免疫功能的检测方法及应用

权利要求书

1.一种非疾病诊断目的的人体免疫功能的检测方法得到的检测结果在提供免疫功能信息中的应用；

所述应用的步骤为：参照提示标准比对检测结果，得出机体状态分析结果；

所述提示标准与机体免疫状态对照表如下：

；

提示机体处于免疫抑制状态的数量≥2时，判断机体处于免疫抑制状态；

提示机体处于免疫过度活跃状态的数量≥2时，判断机体处于免疫过度活跃状态；

提示机体处于免疫激活状态的数量≥2或者提示机体处于免疫激活状态状态的检测指标高于参考值高线或低于参考值低线，且超过参考值范围≥10％时，判断机体处于免疫激活状态；

所述检测方法包括以下步骤：

1)将人外周血与不同抗体组分别混合，进行孵育；

所述抗体组包括第一抗体组、第二抗体组、第三抗体组、CD3-FITC、CD28-PE、CD8a-PE-cy7和CD20-APC；

所述第一抗体组包括CD3-FITC、FOXP3-PE和CD4-PE-cy7；所述第二抗体组包括CD3-FITC、CD28-PE、CD8a-PE-cy7和CD20-APC；所述第三抗体组包括CD3-FITC、CD16-PE和CD56-APC；

2)加入红细胞裂解液，进行孵育，离心，弃上清；

3)采用细胞染色缓冲液对沉淀进行第一重悬，离心，弃上清，采用细胞染色缓冲液对沉淀进行第二重悬，得到待检样品；

4)采用流式细胞仪检测步骤3)所述待检样品中FSC/SSC、CD3⁺、CD3-CD20⁺、CD3-CD16⁺CD56⁺、CD3⁺CD4⁺CD3⁺CD8⁺、CD3⁺CD8⁺CD28⁺、CD3⁺CD8⁺CD28^-和CD3⁺CD4⁺FOXP3⁺的数量百分比，并计算CD3⁺CD4⁺/CD3⁺CD8⁺的数值，得到分析数据；

所述流式细胞仪的检测参数参见下表：

5)参照评估标准比对分析数据，得出人体免疫功能的检测结果；

步骤5)中所述评估标准参照下表：

。

2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，步骤1)中所述混合的容器为EDTA抗凝管。

3.根据权利要求1或2所述的应用，其特征在于，步骤1)中所述CD20-APC替换为CD19-APC。

4.根据权利要求3所述的应用，其特征在于，所述孵育的过程避光进行；所述孵育的温度为16～26℃；所述孵育的时间为10～20min。

5.根据权利要求4所述的应用，其特征在于，所述离心的离心力为300～400g；所述离心的时间为3～8min。