[发明专利]烟草青枯病抗性鉴定病圃的建立方法

说明书

本发明公开了一种烟草青枯病抗性鉴定病圃的建立方法，首先选择适宜种植烟草的平坦地块，选取易感青枯病品种进行种植，接种青枯病病菌，待成熟后期时，取田间病株茎秆进行粉碎后，均匀撒在病圃地块中，再进行翻耕覆土；第二年，选取易感青枯病品种和中抗品种分别接种和不接种青枯病病菌，接种和未接种的品种抗病等级相同，该地块即作为青枯病病圃对烟草品种进行青枯病抗性鉴定使用，等级不同，继续将发病烟株茎秆进行粉碎后均匀撒至病圃地块并进行翻耕覆土，重新种植鉴定至等级相同。本发明克服了病圃建立所需时间长、地块选择要求高及不稳定因素多等环境限制因素，提供了快速建立准确性高、可重复性强的青枯病抗性鉴定病圃的方法。

技术领域

本发明涉及烟草抗病育种领域，具体涉及一种烟草青枯病抗性鉴定病圃的建立方法。

背景技术

抗病育种过程中通常需要建立稳定准确的抗病性鉴定方法，以便能准确的选择抗病育种材料，建立病圃是传统的烟草育种进行抗病性鉴定的重要途径，将烟草育种材料种植在大田生长环境下的病圃中，结合人工接种和自然诱发发病鉴定，是传统烟草抗病育种采用的主要方法。

目前，用于抗性鉴定的病圃建立是准确抗病育种的重中之重。通常田间病圃的建立多选择病害严重多发的地块，这种符合建立规范病圃的地块不仅少，而且由于病害多发的地块病害种类多，土壤中病菌含量种类多且单一病菌量不足，对单一病害的鉴定影响较大，为此，在任一一块适宜种植烟草的地块上，在田间人为的增加单一病菌量，进而快速建立准确性高、可重复性强的青枯病抗性鉴定病圃。

发明内容

本发明的目的在于克服现有技术的不足，提供了一种烟草青枯病抗性鉴定病圃的建立方法，该方法具有准确性高、可重复性强的特点。

为实现上述目的，本发明所设计一种烟草青枯病抗性鉴定病圃的建立方法，包括以下步骤：

1)选择适宜种植烟草的平坦地块，选取易感青枯病品种进行种植；

2)当烟株生长至旺长期时，开始在烟株茎部接种青枯病病菌；待烟株生长至成熟后期时(即为烟株青枯病发病到达高峰期时)，取田间病株茎秆进行粉碎后，均匀撒在病圃地块中，再进行翻耕覆土；

3)第二年，选取易感青枯病品种和/或中抗品种进行种植；当烟株生长至旺长期时，待烟株生长至成熟后期时(即为烟株青枯病发病到达高峰期时)，每个品种单数排或双数排的烟株茎部接种青枯病病菌；

4)观察接种青枯病病菌的烟株和未接种的烟株发病情况，调查青枯病发病率及发病病级(以株为单位)，计算病情指数，根据病情指数判定抗性等级；

5)比较同一品种中接种青枯病病菌的烟株和未接种的烟株病情指数：

当接种青枯病病菌的烟株和未接种的烟株病情指数在同一区间值内，即判断它们青枯病病情级别一致，符合已知的抗病等级，继续将发病烟株茎秆进行粉碎后均匀撒至病圃地块并进行翻耕覆土，此时，该地块即作为青枯病病圃对烟草品种进行青枯病抗性鉴定使用；

当接种青枯病病菌的烟株和未接种的烟株病情指数不在同一区间值时，即判断它们青枯病病情级别不一致，不符合已知抗病等级，继续取病株茎秆进行粉碎，均匀撒在病圃地块中，再进行翻耕覆土，继续种植相同易感品种和/或中抗病品种重复鉴定，直至满足符合条件方可作为青枯病抗性鉴定病圃使用。

进一步地，所述步骤1)中，易感青枯病的烟草品种选自云烟87、中烟100和吉烟9号。

再进一步地，所述步骤3)中，中抗青枯病的烟草品种选自Coker139、G28和NC95。

再进一步地，所述步骤4)中，青枯病发病率及发病病级，计算病情指数，具体步骤如下：

a.接种前调查1次，接种后每5天调查一次，共调查5次，调查全部烟株发病情况；

b.病情分级方法：