[发明专利]一种获得中国人群个体年龄的方法

说明书

本发明涉及一种获得中国人群个体年龄的方法，提取样本个体的DNA，进行DNA甲基化的亚硫酸氢盐修饰；获得所述DNA的hTERT基因的甲基化程度，建立甲基化程度和年龄的回归模型，即可获得中国人群个体年龄。本发明通过可靠的方法实现了利用血液或血痕对个体年龄的推断。

技术领域

本发明属于获得年龄的方法领域，特别涉及一种获得中国人群个体年龄的方法。

背景技术

个体年龄推断一直是法医学的重要研究课题之一，个体年龄的评估目前主要是依据对骨骼、牙齿等组织以及组织中各类物质的物理和化学特性等随年龄增长的时序性变化。然而，获得的年龄推断结果受到评估者的主观因素的影响，分析需要完整的骨骼或牙齿。如果没有现场留下的形态特征，则无法估计生物样本的年龄。而在许多的案件现场残留的检材只有血液或血痕，使用上述方法则无法进行个体年龄的推断。

如何提供一种方法可以用于公安实战中犯罪现场遗留的生物检材血液或血痕样本，实现对于血液或血痕来源个体年龄的推断，将有利于快速锁定嫌疑人范围，为案件侦破提供线索，提高案件侦破速度，成为研究的热点。

众所周知，DNA甲基化是表观遗传中重要的一种化学修饰，是指DNA甲基转移酶催化胞嘧啶环第5位碳原子形成5-甲基胞嘧啶(5mC)。人类单倍体基因组中约有5×10⁷个CpG，它广泛分布在转座元件、其他重复的DNA和大多数功能基因的编码区，几乎所有的甲基化胞嘧啶都发生在CpG二核苷酸。DNA甲基化在维持基因组遗传物质稳定性和调控基因表达中起重要作用，与肿瘤，遗传病，自身免疫性疾病和衰老的发生密切相关。DNA甲基化与年龄之间存在一定的相关性。一些研究表明，人类DNA甲基化的总体水平随着年龄的增长而降低，并且在细胞分化过程中DNA维持甲基化的能力降低。

人端粒酶逆转录酶(hTERT)是参与肿瘤发生和发展的重要蛋白酶，其启动子区域的甲基化状态影响其表达。hTERT基因启动子含有大量CpG岛，具有富含GC的序列，表明hTERT表达可能受甲基化调节。在肿瘤细胞和组织中，大多数hTERT启动子是高甲基化的，但甲基化模式是复杂的。正常细胞或组织hTERT启动子主要是无甲基或仅低甲基化。以前，对hTERT基因甲基化的研究主要集中在肿瘤发生发展，诊断和治疗的机制上。

如CN 104357561 A公开了一种获得中国人群女性个体年龄的方法和系统，它整合了四个基因上的11个CpG位点，在获取了它们的甲基化率后，对这11个位点和年龄进行了回归分析，建立了回归模型。首先，在预测年龄的时候方法越简单，才会更加的方便、快捷。四个基因，11个CpG位点，会加大工作量和工作难度，此外，它们建立的方法和系统主要针对的是女性群体，当面对男性群体时，方法可能就不会起作用。我们只是针对一个基因，使用最常规的PCR的办法建立的数学模型，适用于大多数年龄段的个体。

发明内容

本发明所要解决的技术问题是提供一种获得中国人群个体年龄的方法，克服因为生物标志物和方法选择不当，造成的预测年龄误差比较大的缺陷。该方法通过MSP(甲基化特异性聚合酶链反应)和Real-time PCR(相对定量和绝对定量)方法探讨了hTERT DNA甲基化与年龄预测的关系，拟合了三种基于甲基化检测的年龄预测模型，对90例1-79岁供者的血液样本进行了年龄预测，实现了利用血液或血痕对个体年龄的推断。

本发明的一种获得中国人群个体年龄的方法，包括：

(1)提取样本个体的DNA，进行DNA甲基化的亚硫酸氢盐修饰；

(2)获得所述DNA的hTERT基因的甲基化程度，建立甲基化程度和年龄的线性回归模型，即可获得中国人群个体年龄。