[发明专利]一株黄芪内生球毛壳菌（Chaetomium sp.）HQ-1及其应用

说明书

本发明公开一株具有较好抗菌活性的黄芪内生真菌Chaetomium sp.HQ‑1。所述黄芪内生菌HQ‑1活性产物differanisole A对G⁺菌金黄色葡萄球菌S.aureus,耐甲氧西林金黄色葡萄球菌MRSA,单核增生李斯特菌L.monocytogenes表现出中等抑制活性。对病原真菌白绢病菌S.rolfsii表现出较强的抑制作用，说明differanisole A具有作为农用抗生素的潜力。本发明提供的黄芪内生真菌Chaetomium sp.HQ‑1可为生产抗菌药物，特别是生产抗植物病原真菌的农用抗生素提供新的资源和途径。

技术领域

本发明属于微生物技术领域，尤其涉及一株黄芪内生球毛壳菌(Chaetomium sp.)HQ-1及其应用。

背景技术

近年来我们对抗生素的滥用，已到了无以复加的地步。无指征、无目标、超剂量、超疗程、多联地使用抗生素，催生了超级细菌的出现。耐甲氧西林金葡菌，耐万古霉素肠球菌，多重耐药铜绿假单胞菌，产Ⅰ型新德里金属β-内酰胺酶泛耐药肠杆科细菌等相继出现，表明细菌耐药性已成为一个日益严重的全球性公共卫生问题。

然而，抗生素的发现高潮已过去半个多世纪，如今新药研发似乎陷入了难以反弹的谷底。1983-2012年间美国FDA批准的抗细菌药种类不断减少；2013-2017 年仅有五类抗细菌药物被FDA批准，其中包括一类抗体药物；四十多年前发现的氟喹诺酮类竟是目前最新的抗革兰氏阴性菌药。新的疾病和严重的细菌耐药性不断侵蚀着人类健康的最后防线，寻找新药是全世界科学家刻不容缓的任务。

内生菌是一类非常重要的微生物资源，它们具有独特的生理和代谢机制，使其能够适应生物体内部特殊的环境，同时还能够产生多种活性物质，一直以来是天然产物学家的研究热点。

研究表明，内生真菌能够产生与宿主植物相同或相似的药用活性成分。利用植物内生菌的次生代谢物质开发新的药物将是今后医药方面的研究方向之一。

黄芪是一种传统中药，具有抗氧化、抗衰老、抗菌、免疫调节等功效。

发明内容

本发明的目的在于提供一种黄芪内生球毛壳菌(Chaetomium sp.)HQ-1及其应用。本发明从中药植物黄芪中分离得到一株具有抗菌活性的内生菌 Chaetomium sp.HQ-1，通过液体发酵、改变培养基组分等方式，对该菌的活性代谢产物进行了研究，从中分离得到一个化合物，经高分辨质谱和核磁分析确定为 differanisole A。进一步活性实验表明该化合物具有中等的抗细菌活性和良好的抗病原真菌Selerotium rolfsii活性。本专利为研制抗细菌、抗真菌类药物提供新的资源和途径。

本发明所述的一种黄芪内生球毛壳菌(Chaetomium sp.)HQ-1，已于2019 年3月26日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(简称 CGMCC，地址为：北京市朝阳区北辰西路1号院3号)，保藏号为CGMCC No. 17474。

所述黄芪内生球毛壳菌(Chaetomium sp.)HQ-1的菌落形态为：本发明所述的黄芪内生菌HQ-1，在PDA培养基上的菌落表面呈白色绒状、背面淡黄色，生长迅速。提取其基因组DNA，利用ITS通用引物ITS1和ITS4进行扩增分析，得到长度为532bp的单一DNA条带，提交GenBank数据库中进行Blast比对，筛选相似度最高的序列，建立系统进化树，最终鉴定为球毛壳属(Chaetomium sp.)。

所述黄芪内生球毛壳菌(Chaetomium sp.)HQ-1的制备方法为：

(1)菌种分离：本发明提供的所述黄芪内生球毛壳菌(Chaetomium sp.) HQ-1通过组织分离法，从严格的表面消毒的药用植物黄芪的叶中分离出来。