[发明专利]SCD根肿菌生理小种鉴定系统及鉴定方法及应用

说明书

本发明属于芸薹属根肿菌生理小种鉴定技术领域，具体涉及一种SCD根肿菌生理小种鉴定系统及鉴定方法。该SCD根肿菌生理小种鉴定系统包括9个寄主材料和14个生理小种类型。将待测根肿菌接种到9个寄主材料中，根据寄主材料的抗病性，可判断待测根肿菌的生理小种类型。发明SCD鉴定系统及相应的鉴定方法，将有助于根肿病生理小种的分类，分布、变异、流行和预防研究，这将极大地加速中国抗根肿病白菜和其他芸薹属作物的育种进程。

技术领域

本发明属于芸薹属根肿菌生理小种鉴定技术领域，具体涉及一种SCD根肿菌生理小种鉴定系统及鉴定方法及应用。

背景技术

由土壤传播的专性寄生植物病原体根肿菌引起的根肿病的快速传播已成为全世界十字花科作物中最严重的病害之一。根肿菌感染导致寄主根部细胞增生和肥大，其抑制营养和水运输导致植物枯萎，降低植物产量。根肿病可以影响几乎所有的芸薹属物种，包括大白菜、卷心菜、油菜和萝卜。作物轮作和化学处理如氟啶胺和氰霜唑已被证明对根肿病防治有效。然而，作物轮作将需要很长时间，因为根肿菌可以在土壤中存活超过15年；化学处理的方法可造成环境污染。因此，抗病育种是防治根肿病的最有效和保护环境的策略。

病原菌的遗传变异导致根肿病抗病品种的抗性丧失，使生理小种分类变得更加复杂。由于根肿菌遗传变异或土壤中根肿菌主要致病型的变化，导致转育的一个或两个抗病基因的根肿病抗性品种将在几年内失去抗性，需要再次重新育种。抗病品种育种成功的关键在于根肿菌生理小种鉴定。基于过去几十年中对不同芸薹属寄主的发病情况调查，已经开发了几种针对芸薹属根肿菌生理小种鉴定系统：(1)Williams鉴别系统(参考文献(1)，Williams,P.H.1966)，包括四个寄主Badger shipper,Jersey Queen,Laurentian和Wilhelmsburger，理论上可将根肿菌生理小种分类为16个。(2)ECD鉴别系统(参考文献(2)，Buczacki et al，1975)，包括Brassica campestris，Brassica napus和Brassicaoleracea；Williams和ECD鉴别系统已被广泛用于对芸薹属根肿菌的生理小种鉴定，尽管这些寄主中的一些显示出中间型或者不稳定的发病指数。(3)Somé等人(参考文献(3)，Soméet al,1996)开发了一个由三个欧洲油菜品系构成的芸薹属根肿菌分类系统，包括Nevin，Wilhelmsburger和Brutor，Somé等人开发的分类系统将20个根肿菌分为5个不同的生理小种。(4)Strelkov等人报道(参考文献(4)，Strelkov et al.2018)了包含13个寄主的Canadian Clubroot Differential(CCD)系统，在加拿大将106个根肿菌样品划分为17个生理小种。

尽管已经有上述6种根肿菌生理小种鉴定系统的研发，但均不是针对中国环境开发的.在中国，十字花科作物种植面积大、气候条件差异大为根肿菌种群变异提供了有利条件，根肿菌生理小种致病型与其他国家区域呈现不同的特点。上述Williams、ECD、Somé等和CCD系统用于中国地区根肿菌生理小种分类仍然有一些局限性。例如，这些生理小种分类系统中使用的寄主对我国根肿菌表现出不稳定的抗病或感病类型。这将严重影响根肿菌生理小种鉴定的准确性，从而影响抗病品种的育种。因此，需要开发一种适用于中国地区且具有稳定鉴别能力的生理小种鉴定系统。

发明内容

本发明提供了一种SCD根肿菌生理小种鉴定系统及鉴定方法及应用，提供了一种适用于中国地区且具有稳定鉴别能力的生理小种鉴定系统。

本发明的第一个目的是提供一种SCD根肿菌生理小种鉴定系统，如下表所示：

其中，Pb1-Pb14为生理小种类型。

本发明的第二个目的是提供一种利用所述的SCD根肿菌生理小种鉴定系统鉴定芸薹属根肿菌生理小种类型的方法，包括以下步骤：

S1，准备根肿菌菌液