[发明专利]VEGF单域抗体、核苷酸序列及试剂盒

说明书

本发明公开一种VEGF单域抗体、核苷酸序列及试剂盒，其中，该VEGF单域抗体包括四个框架区域以及三个互补决定区CDR1、CDR2、CDR3，其中，CDR1：Val Pro Asp Met His；CDR2：Thr Ile Thr Arg Gly Gly Asn Thr Met Tyr Ala Asp Ser Val Lys；CDR3：Thr Ile Thr Arg Gly Gly Asn Thr Met Tyr Ala Asp Ser Val Lys。本发明技术方案得到一种特异性结合VEGF蛋白的单域抗体，该抗体特异性结合VEGF单域抗体蛋白的活性高，分子量小，表达量高，制造成本低，易于后续改造。

技术领域

本发明涉及基因工程技术领域，特别涉及一种VEGF单域抗体、核苷酸序列及试剂盒。

背景技术

VEGF族包括VEGF-A、VEGF-B、VEGF-C、VEGF-D、VEGF-E和胎盘生长因子。VEGF-A 发现最早，在组织和细胞中含量最丰富，功能最强，通常所指的VEGF即VEGF-A。VEGF 主要通过刺激血管内皮细胞有丝分裂、诱导基底膜降解使内皮细胞迁移而促进血管生成，它可以增强和维持毛细血管的通透性，不仅有利于新生血管以出芽的方式生成，还有利于营养物质的运输和炎症的扩散。健康人体和病变组织均可表达 VEGF，通过促进血管生成参与机体的生长发育、创伤修复，并在肿瘤的生长转移中发挥作用。因VEGF在肿瘤生长时血管生成中发挥重要作用，以VEGF及其受体信号转导通路为靶点的血管生成抑制剂具有广阔的开发前景。通过抑制VEGF或阻断相应受体信号传导通络，可抑制内皮细胞的增生、迁移和血管生成，阻止肿瘤扩散。因此，VEGF特异性抗体也是近年抗肿瘤方向研究的热点。

然而，现有技术中VEGF抗体与抗原结合活性偏低，分子量偏大，表达量偏低，制造成本偏高，不利于后续改造。

发明内容

本发明的主要目的是提供一种VEGF单域抗体，旨在解决现有VEGF抗体结合活性偏低的问题。

为实现上述目的，本发明提出一种VEGF单域抗体，所述VEGF单域抗体的氨基酸序列如SEQ ID NO：7所示，所述VEGF单域抗体包括四个框架区域以及三个互补决定区CDR1、CDR2、CDR3，其中，

CDR1：Val Pro Asp Met His；

CDR2：ThrIle ThrArgGlyGlyAsnThr Met Tyr AlaAsp Ser Val Lys；

CDR3：AlaAspValTrpSerSerAlaLeuPheLysLeuValGlu。

在一实施例中，所述四个框架区分别为FR1、FR2、FR3、FR4，其中，

FR1：Gly Val Lys LeuGlu Asp SerGlyGlyGlyLeu Val GlnAlaGlyGlySerLeuArgLeuSerCysAlaAlaSerGlySer Ile Ser Tyr；

FR2：Trp Tyr ArgGlnAlaPro GlyGlnGlnArgGlnLeu Val Ala；

FR3：GlyArgPheThr Ile SerArg Asp AsnAla Lys AsnThr Val Tyr LeuGln MetThrSerLeu Lys Pro Glu Asp ThrAla Val Tyr TyrCysAsn；

FR4：TyrTrpGlyGlnGlyThrGln Val Thr Val SerSer。

本发明还提供一种核苷酸序列，所述核苷酸序列编码VEGF单域抗体，所述VEGF单域抗体包括四个框架区域以及三个互补决定区CDR1、CDR2、CDR3，其中，

CDR1：Val Pro Asp Met His；