[发明专利]三分三P450酶及其在制备托品酮中的应用有效
| 申请号： | 201910299176.4 | 申请日： | 2019-04-15 |
| 公开（公告）号： | CN111826355B | 公开（公告）日： | 2021-11-26 |
| 发明（设计）人： | 肖友利;尤文静;平羽;杨盟权 | 申请（专利权）人： | 中国科学院分子植物科学卓越创新中心 |
| 主分类号： | C12N9/02 | 分类号： | C12N9/02;C12N15/53;C12P17/18 |
| 代理公司： | 上海申浩律师事务所 31280 | 代理人： | 贾师英 |
| 地址： | 200032 *** | 国省代码： | 上海;31 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 三分 p450 及其 制备 托品酮 中的 应用 | ||
1.一种分离的多肽，所述多肽的氨基酸序列是SEQ ID NO:1。
2.分离的多核苷酸，所述多核苷酸编码如权利要求1所述的多肽。
3.如权利要求2所述的多核苷酸，其特征在于，其核苷酸序列如SEQ ID NO:2所示。
4.包含如权利要求2所述多核苷酸的载体。
5.一种用于表达如权利要求1所述多肽的微生物，其特征在于，所述微生物转化了如权利要求4所述载体。
6.如权利要求5所述的微生物，其特征在于，所述微生物选自大肠杆菌、毕赤酵母、酿酒酵母、解脂耶氏酵母、枯草杆菌。
7.如权利要求1所述多肽、或者如权利要求5所述微生物在制备托品酮中的应用。
8.如权利要求7所述的应用，其特征在于，以4-(1-甲基-2-吡咯烷基)-3-氧代丁酸为底物原料，在如权利要求1所述多肽和细胞色素P450还原酶的联合催化下进行反应来制备托品酮。
9.如权利要求8所述的应用，其特征在于，所述细胞色素P450还原酶的氨基酸序列为SEQ ID NO:3、SEQ ID NO:5或者SEQ ID NO:7。
10.如权利要求9所述的应用，其特征在于，编码细胞色素P450还原酶SEQ ID NO:3的基因是SEQ ID NO:4；编码细胞色素P450还原酶SEQ ID NO:5的基因是SEQ ID NO:6；编码细胞色素P450还原酶SEQ ID NO:7的基因是SEQ ID NO:8。
11.如权利要求8所述的应用，其特征在于，所述权利要求1的多肽和细胞色素P450还原酶在同一个微生物中共表达；或者在不同的微生物中分别表达。
12.如权利要求8所述的应用，其特征在于，反应体系中还添加有二硫苏糖醇和NADPH。
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