[发明专利]一种用于检测水稻抗褐飞虱基因Bph14的引物对及其应用

说明书

本发明公开一种用于检测水稻抗褐飞虱基因Bph14的引物对及其应用，所述用于检测水稻抗褐飞虱基因Bph14的引物对为共显性标记引物B14InD，所述共显性标记引物B14InD为：正向引物序列：CTACTGATTGCAGATTGACG；反向引物序列：CACTTGGTGAACTTATTCCCTT。本发明采用所述用于检测水稻抗褐飞虱基因Bph14的引物对经PCR扩增得到Bph14特异性共显性分子标记，其定位的抗褐飞虱基因位置明确，通过检测Bph14基因的特异性共显性分子标记，即可用于水稻品种或品系的基因型检测，可预测水稻植株的褐飞虱抗性，有利于提高抗褐飞虱水稻的育种效率。

技术领域

本发明涉及基因工程技术领域，特别涉及分子标记技术领域，具体涉及一种用于检测水稻抗褐飞虱基因Bph14的引物对及其应用。

背景技术

水稻是我国的主要粮食作物之一，褐飞虱是为害水稻最严重的害虫。它的成虫和若虫均可以直接刺吸水稻韧皮部汁液，导致植株黄叶甚至枯死。褐飞虱群体爆发多发生在水稻成熟灌浆期，为害地域由南向北扩展，发生频次增加，危害程度加重。据中国农业年鉴记载，目前我国每年水稻稻飞虱(主要是褐飞虱)发生面积为2000万公顷以上，每年因稻飞虱危害造成的直接产量损失达100万吨以上，由此可见，褐飞虱已对我国水稻生产安全构成严重威胁。

一直以来，褐飞虱的防治主要是依靠施用化学杀虫剂。杀虫剂的大量施用，在一定程度上和一定时间段内控制了褐飞虱的危害，但也消灭了稻田中的褐飞虱天敌。另外，由于化学杀虫剂的连年大量施用，导致褐飞虱抗药性成倍增加，且一些农药对褐飞虱具有刺激生殖作用，加剧了稻飞虱的再增猖獗，使得依靠特效农药也不能实现稻飞虱可持续治理的目标。同时，化学杀虫剂加重了生态环境和粮食的污染，增加了农民的生产成本，给新时期农民增收带来挑战。

褐飞虱连年持续爆发猖獗的内在原因是我国水稻品种大面积种植的主要水稻品种抗褐飞虱性能普遍差，加上杂交稻品种株型高大，中后期田间群体大，茎叶茂密，田间郁蔽度高，营养适宜，有利于褐飞虱快速繁殖，对褐飞虱等虫害表现为“超感虫性”，在虫源基数大、气候条件适宜时，极易形成爆发流行之势，造成严重危害。实践证明利用抗褐飞虱基因培育抗褐飞虱水稻品种，是褐飞虱综合防治中最为经济、有效、安全、生态的方法。

迄今为止，在栽培稻和野生稻资源中已经鉴定并报道了30多个抗褐飞虱主效基因，大部分抗褐飞虱主效基因均已被定位到水稻不同的染色体上。武汉大学何光存教授研究组通过药用野生稻(Oryza officinalis Wall ex Watt)与普通栽培稻珍汕97B经过多代杂交选育，获得对常见的几种褐飞虱的生物型1、2、3表现为高抗的水稻品种B5。B5中鉴定定位了2个显性的抗褐飞虱基因Bph14和Bph15，其中Bph14定位于第三染色体长臂，并已被成功克隆。

由于水稻材料抗虫性鉴定的复杂性，在常规转育抗虫基因的回交育种中，一般要采用苗期集团鉴定法，该鉴定方法无法对单株鉴定，只能通过对后代的抗虫鉴定来确定当代的抗虫性。因此，利用常规育种手段进行抗虫基因的转育效率低下，往往难以有效地导入或聚合不同的抗虫基因，不利于提高抗虫水稻的育种效率。

发明内容

本发明的主要目的是提出一种用于检测水稻抗褐飞虱基因Bph14的引物对及其应用，旨在提高抗褐飞虱水稻的育种效率。

为实现上述目的，本发明提出一种用于检测水稻抗褐飞虱基因Bph14的引物对，所述用于检测水稻抗褐飞虱基因Bph14的引物对为共显性标记引物B14InD，所述共显性标记引物B14InD为：

正向引物序列：CTACTGATTGCAGATTGACG；

反向引物序列：CACTTGGTGAACTTATTCCCTT。

为实现上述目的，本发明还提出一种水稻抗褐飞虱基因Bph14的特异性共显性分子标记，所述水稻抗褐飞虱基因Bph14的特异性共显性分子标记由如上所述的用于检测水稻抗褐飞虱基因Bph14的引物对经PCR扩增获得。