[发明专利]一种泛素化缺失的嵌合抗原受体及其用途

权利要求书

1.一种用于维持T细胞增殖能力的嵌合抗原受体，包括：

依次连接的胞外结构域、跨膜结构域、胞内结构域；

所述胞外结构域包括抗原识别区；

所述胞内结构域包括依次连接的共刺激信号传导区和CD3ζ胞内区，形成共刺激信号传导区-CD3ζ胞内区；

所述共刺激信号传导区-CD3ζ胞内区为野生型共刺激信号传导区-CD3ζ胞内区中的赖氨酸突变为精氨酸形成的多肽；

所述共刺激信号传导区选自CD28或41BB的胞内区；

所述共刺激信号传导区-CD3ζ胞内区的氨基酸序列如SEQ ID NO：4或SEQ ID NO：5所示。

2.如权利要求1所述的用于维持T细胞增殖能力的嵌合抗原受体，其特征在于，还包括以下特征中的一项或多项：

(1)所述41BB胞内区的氨基酸序列如SEQ ID NO：1所示；

(2)所述CD28胞内区的氨基酸序列如SEQ ID NO：2所示；

(3)所述CD3ζ胞内区的氨基酸序列如SEQ ID NO：3所示。

3.如权利要求1所述的用于维持T细胞增殖能力的嵌合抗原受体，其特征在于，还包括一下特征中的一项或多项：

a.所述抗原识别区选自针对肿瘤表面抗原的单链抗体，所述肿瘤表面抗原选自CD19、CD123、CD30、BCMA、Her2、IL13Rα2和GD2中的一种或多种；

b.所述胞外结构域还包括信号肽和/或铰链区，形成依次连接的信号肽-抗原识别区铰链区；

c.所述跨膜结构域选自CD4、CD8α、OX40或H2-Kb的跨膜区；

d.所述嵌合抗原受体的氨基酸序列如SEQ ID NO：11-14任一所示。

4.如权利要求3所述的用于维持T细胞增殖能力的嵌合抗原受体，其特征在于，特征a，所述单链抗体选自FMC63或14g2a。

5.如权利要求3所述的用于维持T细胞增殖能力的嵌合抗原受体，其特征在于，特征b中，所述信号肽选自CD8α信号肽和/或所述铰链区选自CD8α的铰链区。

6.一种多核苷酸序列，该多核苷酸序列选自：

(1)编码权利要求1-5任一所述的用于维持T细胞增殖能力的嵌合抗原受体的多核苷酸序列；和

(2)(1)所述多核苷酸序列的互补序列。

7.如权利要求6所述的多核苷酸序列，其特征在于，所述多核苷酸序列如SEQ ID NO：15-18任一所示。

8.一种核酸构建物，所述核酸构建物含有权利要求6-7任一所述的多核苷酸序列。

9.如权利要求8所述的核酸构建物，其特征在于，所述核酸构建物为载体。

10.如权利要求9所述的核酸构建物，其特征在于，所述核酸构建物为慢病毒载体，含有复制起始位点、3’LTR、5’LTR以及权利要求6-7任一所述的多核苷酸序列。

11.一种慢病毒，所述慢病毒含有权利要求8所述的核酸构建物。

12.一种离体活化T细胞的方法，所述方法包括使用权利要求9所述的慢病毒感染所述T细胞的步骤。

13.一种基因修饰的T细胞或含该基因修饰的T细胞的药物组合物，其特征在于，所述细胞含有权利要求6-7任一所述的多核苷酸序列，或含有权利要求8-10任一所述的核酸构建物，或感染了权利要求11所述的慢病毒，或采用权利要求12所述的方法制备得到。

14.权利要求1－5中任一项所述的用于维持T细胞增殖能力的嵌合抗原受体、权利要求6-7任一所述的多核苷酸序列、权利要求8-10任一所述的核酸构建物或权利要求11所述的慢病毒或权利要求13所述的基因修饰的T细胞在制备肿瘤治疗药物中的应用。