[发明专利]一种细胞冻存液及其应用

说明书

本发明涉及一种细胞冻存液及其应用，所述细胞冻存液含有以下组分：甘油、氯化钠、乳酸钠、氯化钾、氯化钙、二甲基亚砜、甜菜碱、抗冻蛋白、葡萄糖、低分子葡聚糖、甘露聚糖、精蛋白、纳他霉素、苦豆碱、金精三羧酸、氨磷汀、小牛血清和人白蛋白。还涉及细胞冻存液在保护组织细胞活性中的应用和细胞冻存液在保护血液有核细胞活性中的应用。本发明配制的细胞冻存液与细胞混合后，可于5～25℃条件下，保存48小时左右而不影响细胞的活性，温度范围较宽，保存时间较长，为血液样本的运输提供了方便。

技术领域

本发明属于细胞冻存复苏技术领域，特别涉及一种改进的人体细胞冻存液及其应用。

背景技术

细胞不仅是生命科学研究的重要目标和工具，而且随着研究的进展，各种细胞已广泛应用于临床。造血干细胞是血液系统中的成体干细胞，是一个异质性的群体，具有长期自我更新的能力和分化成各类成熟血细胞的潜能。造血干细胞移植可以治疗许多血液病，包括：1)血液系统恶性肿瘤，如急性白血病、慢性粒细胞白血病、淋巴瘤、多发性骨髓瘤、骨髓增生异常综合征等；2)某些血液系统非恶性肿瘤，如重型再生障碍性贫血、地中海贫血。间充质干细胞是一种多能干细胞，它具有干细胞的所有共性，即自我更新和多向分化能力，适用于衰老和病变引起的组织器官损伤修复的种子细胞。

因此，细胞制备后，为方便细胞长期保存和长距离运输，有效的冻存细胞，并且保持细胞特性不变，对于生命科学研究和细胞在临床上的应用极为重要。因此，本专利阐述了在细胞体外培养后的超低温冻存方法及细胞冻存液体的制备方法。

发明内容

针对现有技术的不足，本发明公开了一种细胞冻存液及其应用。

本发明所采用的技术方案如下：

一种细胞冻存液，所述细胞冻存液含有以下组分：甘油的体积浓度为15-40％，氯化钠的质量浓度为0.3-1.2％，乳酸钠的质量浓度为0.3-0.6％，氯化钾的质量浓度为0.03-0.6％，氯化钙的质量浓度为0.01-0.03％，二甲基亚砜的体积浓度为1-20％，甜菜碱的质量浓度为5-20％，抗冻蛋白的质量浓度为1-10％，葡萄糖的质量浓度为5-40％，低分子葡聚糖的质量浓度为1-20％，甘露聚糖的质量浓度0.05-5％，精蛋白的质量浓度为0.5-5％，纳他霉素的质量浓度为0.5-5％，苦豆碱的质量浓度为0.1-5％，金精三羧酸的质量浓度为0.1-2％，氨磷汀的质量浓度为0.5-10％，小牛血清的体积浓度为5-20％，人白蛋白的质量浓度为5-15％。

优选的，所述细胞冻存液含有以下组分：甘油的体积浓度为20％，氯化钠的质量浓度为0.6％，乳酸钠的质量浓度为0.3％，氯化钾的质量浓度为0.03％，氯化钙的质量浓度为0.02％，二甲基亚砜的体积浓度为3％，甜菜碱的质量浓度为5％，抗冻蛋白的质量浓度为5％，葡萄糖的质量浓度为12％，低分子葡聚糖的质量浓度为5％，甘露聚糖的质量浓度为0.05％，精蛋白的质量浓度为0.5％，纳他霉素的质量浓度为0.5％，苦豆碱的质量浓度为0.3％，金精三羧酸的质量浓度为0.5％，氨磷汀的质量浓度为0.5％，小牛血清的体积浓度为10％，人白蛋白的质量浓度为10％。

其进一步的技术方案为，所述细胞冻存液的pH值为7.0-7.5。

如上任一项所述的细胞冻存液在用于保护组织细胞活性中的应用。

其进一步的技术方案为，所述细胞的冻存密度为1×10⁹/L-8×10¹¹/L。

如上任一项所述的细胞冻存液在用于保护血液有核细胞活性中的应用。

其进一步的技术方案为，所述细胞的冻存密度为1×10⁹/L～8×10¹¹/L。

在细胞冻存液组份中：