[发明专利]SAE2在制备肝癌术后预后评估试剂盒中的应用

说明书

本发明提供了SAE2在制备肝癌术后预后评估试剂盒中的新应用。本发明人经过广泛而深入的研究，首次发现，采用免疫组化方法检测SAE2在肝癌组织中的相对表达量，能够判断肝癌患者出现肝癌复发转移的风险。本发明的有益效果主要体现在：本发明提供了SAE2在制备肝癌术后预后评估试剂盒中的应用，提示该蛋白能用于制备判断肝癌患者预后的蛋白质分子标记，对于肝癌病人术后监控和序贯治疗也具有重要的指导意义。

技术领域

本发明涉及SAE2在制备肝癌术后预后评估试剂盒中的应用。

背景技术

肝癌即肝脏恶性肿瘤，可分为原发性和继发性两大类。原发性肝脏恶性肿瘤起源于肝脏的上皮或间叶组织，前者称为原发性肝癌，是我国高发的，危害极大的恶性肿瘤；后者称为肉瘤，与原发性肝癌相比较较为少见。继发性或称转移性肝癌系指全身多个器官起源的恶性肿瘤侵犯至肝脏。一般多见于胃、胆道、胰腺、结直肠、卵巢、子宫、肺、乳腺等器官恶性肿瘤的肝转移。

SUMO化修饰是一个动态可逆的过程，SUMO分子通过在E1活化酶、E2结合酶和E3连接酶的参与下共价结合到底物蛋白赖氨酸残基上，调控底物蛋白的结构与功能，而SENPs则通过特异性地对底物靶蛋白去SUMO化修饰，与SUMO分子共同调节底物蛋白的SUMO化状态，进而调控细胞功能。SAE2是SUMO 的E1活化酶之一，对SUMO信号通路具有重要的影响。

本发明研究发现在肝癌中的SAE2表达与病人术后预后存在显著的关系，暗示SAE2可作为肝癌的术后预后的有效预警蛋白。

肝癌做为对人类健康威胁最大的肿瘤之一，至今其发生的分子机制仍不清楚，对其的治疗也缺少特异性的分子靶点，而SAE2做为十分重要的肿瘤癌基因，目前尚无文献报道SAE2与判断肝癌预后或肝癌转移相关。

发明内容

本发明目的是提供SAE2在制备肝癌术后预后评估试剂盒中的新应用。

本发明采用的技术方案是：

SAE2在制备肝癌术后预后评估试剂盒中的应用。

本发明人经过广泛而深入的研究，首次发现，采用免疫组化方法检测SAE2在肝癌组织中的相对表达量，能够判断肝癌患者出现肝癌复发转移的风险。基于SAE2表达量与肝癌复发转移的相关性，以该蛋白作为预后标记物对其表达量进行检测可以用于指导肝癌的预后判断，因此可将SAE2作为分子标记，利用 SAE2单克隆抗体或多克隆抗体，结合免疫组化实验试剂，检测SAE2在肝癌组织中的相对表达量。

所述试剂盒主要包括：人源SAE2单克隆抗体或多克隆抗体、免疫组化实验试剂。所述免疫组化实验试剂为本领域免疫组化实验中的常用试剂。

发明人在发现，SAE2在复发转移肝癌组织中表达高于未复发转移肝癌组织，可以推测SAE2在肝癌术后复发转移发挥重要作用。查阅国内外文献，SAE2与肝癌的发生以及复发转移的相关研究少，在本实验中，SAE2在肝癌组织中的表达上调，而在癌旁和正常乳腺组织中则表达下调，且与未复发转移组相比， SAE2在复发转移组中表达也上调，表明SAE2可能作为促进因子参与肝癌发生发展过程。通过Kaplan-Meier 生存曲线分析，SAE2表达程度与肝癌患者的预后有关，SAE2高表达的患者预后不良(P<0.05)。

综上所述，SAE2在肝癌组织中高表达，SAE2的高表达与肝癌患者术后复发转移有关。SAE2可以作为肝癌预后的一个重要候选分子标记物。

优选的，所述人源SAE2多克隆抗体由序列为SEQ ID NO.1所示的SAE2免疫兔子获得，可自行制备，也可采用市购商品。

具体的，所述免疫组化实验试剂包括：二甲苯、乙醇、3％H₂O₂(水溶液)、3％BSA封闭液(以PBS 配制)、DAB显色试剂、苏木素、辣根过氧化物酶(用于标记二抗)、PBS(pH7.4)、0.01M EDTA修复液。