[发明专利]一种用于区分结核杆菌和BCG疫苗的sRNA标志物及其用途有效
| 申请号： | 201910304999.1 | 申请日： | 2019-04-16 |
| 公开（公告）号： | CN110093432B | 公开（公告）日： | 2022-06-28 |
| 发明（设计）人： | 付英梅;张凤民;宋武琦;李爱梅;刘鑫一;房勇 | 申请（专利权）人： | 哈尔滨医科大学 |
| 主分类号： | C12Q1/689 | 分类号： | C12Q1/689;C12Q1/6851;C12Q1/04;C12N15/11;C12R1/32 |
| 代理公司： | 北京科龙寰宇知识产权代理有限责任公司 11139 | 代理人： | 孙皓晨;马鑫 |
| 地址： | 150081 黑龙*** | 国省代码： | 黑龙江;23 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 用于 区分 结核杆菌 bcg 疫苗 srna 标志 及其 用途 | ||
1.检测sRNA标志物表达量的试剂在制备区分结核杆菌和BCG疫苗试剂中的用途，所述的sRNA标志物包括MTS0997、MTS1338以及MTS2823其中至少一种。
2.一种用于区分结核杆菌和BCG疫苗的引物组合在制备区分结核杆菌和BCG疫苗试剂中的用途，其特征在于，所述的引物组合包括用于检测MTS0997、MTS1338以及MTS2823其中至少一种sRNA标志物的引物对，其中：
用于检测MTS0997的引物对由上游引物和下游引物组成，所述的上游引物的核苷酸序列如SEQ ID NO.3所示，所述的下游引物的核苷酸序列如SEQ ID NO.4所示；
用于检测MTS1338的引物对由上游引物和下游引物组成，所述的上游引物的核苷酸序列如SEQ ID NO.5所示，所述的下游引物的核苷酸序列如SEQ ID NO.6所示；
用于检测MTS2823的引物对由上游引物和下游引物组成，所述的上游引物的核苷酸序列如SEQ ID NO.7所示，所述的下游引物的核苷酸序列如SEQ ID NO.8所示。
3.一种用于区分结核杆菌和BCG疫苗的实时荧光定量PCR试剂盒在制备区分结核杆菌和BCG疫苗试剂中的用途，其特征在于，所述的试剂盒中含有用于检测MTS0997、MTS1338以及MTS2823其中至少一种sRNA标志物的引物对，其中：
用于检测MTS0997的引物对由上游引物和下游引物组成，所述的上游引物的核苷酸序列如SEQ ID NO.3所示，所述的下游引物的核苷酸序列如SEQ ID NO.4所示；
用于检测MTS1338的引物对由上游引物和下游引物组成，所述的上游引物的核苷酸序列如SEQ ID NO.5所示，所述的下游引物的核苷酸序列如SEQ ID NO.6所示；
用于检测MTS2823的引物对由上游引物和下游引物组成，所述的上游引物的核苷酸序列如SEQ ID NO.7所示，所述的下游引物的核苷酸序列如SEQ ID NO.8所示。
4.如权利要求3所述的用途，其特征在于，所述的试剂盒中还含有Eva Green 2xqPCRMaster Mix。
5.如权利要求3所述的用途，其特征在于，用于区分结核杆菌和BCG疫苗时，实时荧光定量PCR体系配制为：EvaGreen 2xqPCR MasterMix 10μL，用于检测MTS0997、MTS1338或MTS2823的上下游引物各0.6μL，cDNA模板2μL，加去离子水补充体积至20μL。
6.如权利要求3所述的用途，其特征在于，用于区分结核杆菌和BCG疫苗时，实时荧光定量PCR的反应条件为：
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