[发明专利]一种灵芝孢子粉的破壁方法

说明书

本发明涉及一种灵芝孢子粉的破壁方法，具体步骤为：将灵芝孢子粉与水混合，在液氮中冷冻后，于50℃下水浴溶解；反复冻融数次；去除水，加入羧基化四氧化三铁纳米磁珠，超声破壁，得破壁后的灵芝孢子粉。采用本发明所述灵芝孢子粉破壁方法可以实现精准破壁，最大程度保留孢子粉的细胞结构，且所得孢子粉金属离子残留少、酸败度低、保存时间较长。

技术领域

本发明涉及一种灵芝孢子粉的破壁方法，属于细胞生物技术领域。

技术背景

灵芝孢子粉的表面有两层壁，主要成分是葡萄糖和几丁质，在细胞壁的表面有均匀分布的孔洞。灵芝孢子粉的壁十分坚硬且极难被氧化分解，未经处理的孢子粉会限制机体对它的利用，所以通常会对孢子粉做破壁处理以便充分利用孢子内的有效物质。目前常用的孢子粉破壁方法有研磨法、酶解法、超声波法、超音速气流法等，这些方法各有优缺点。例如利用溶壁酶进行酶解法破壁，过程比较亲和且有效成分不易损失，但是溶壁酶价格昂贵造成成本较高；利用机械法破壁时，由于孢子粉极其微小，会造成破壁不充分甚至无法破壁的现象，所以只能在干燥下直接用外力对孢子粉破壁，如研磨法，但是研磨法会完全破坏孢子结构，严重损失孢子有效物质；利用超音速气流法破壁最初的破壁效率会很高，但是随着越来越多的孢子被破壁，内容物流出，使外力强度降低而造成破壁效率变小。

此外，金属离子的残留是机械破壁方法的重要弊端，尤其是重金属的残留会直接对人体造成危害。《中国药典》中常用酸值、过氧化值和羰基值3个指标来衡量油脂的酸败度。灵芝孢子粉内含有大量的不饱和脂肪酸，经破壁处理后，孢子粉如果暴露在有氧的环境下，一方面其含有的不饱和脂肪酸会发生自动氧化，产生过氧化物继而降解成挥发性醛、酮和酸的复杂混合物，另一方面是微生物可把油脂分解为游离脂肪酸和甘油，这些脂肪酸经系列酶促反应会产生挥发性的低级酮，甘油则可被氧化成1，2－环氧丙醛，也即人们常说的酸败。这些有害物质会破坏孢子粉中的其它有效成分，严重影响孢子粉的质量，进而对人的健康产生危害。

发明内容

针对上述现有技术中存在的问题，本发明的目的是提供一种灵芝孢子粉的破壁方法，所述方法可以精准破壁，最大程度保留孢子粉的细胞结构，且所得孢子粉金属离子残留少、酸败度低、保存时间较长。

为实现上述目的，本发明采用的技术方案如下：

一种灵芝孢子粉的破壁方法，其特征在于，具体步骤如下：

将灵芝孢子粉与水混合，在液氮中冷冻后，于50℃下水浴溶解；反复冻融数次；去除水，加入羧基化四氧化三铁纳米磁珠，超声破壁，得破壁后的灵芝孢子粉。

按上述方案，优选地，所述灵芝孢子粉与所述水的用量比为0.1-0.5g：3-15mL。

按上述方案，优选地，所述冷冻的时间为3-10min，所述水浴的时间为3-10min。

按上述方案，优选地，所述羧基化四氧化三铁纳米磁珠的粒径为80-100nm。

按上述方案，优选地，所述羧基化四氧化三铁纳米磁珠的用量与所述孢子粉的用量比为1～3mL：0.1g。

按上述方案，优选地，所述超声破壁的方法具体为：超声开3s，关1s；依次循环，共计超声时间40min。

本发明技术原理在于：

本发明首先利用反复冻融的方法使灵芝孢子粉细胞壁变脆，容易被破开，再向破壁体系中加入羧基化四氧化三铁纳米磁珠作为破壁工具，最后用超声波作外力加以破壁，处理完成后再用磁铁把纳米磁性氧化铁吸出。

相比于现有技术，本发明具有的有益效果如下：

1、本发明所用原材料价格便宜，所得破壁后的灵芝孢子粉中金属离子残留少、酸败度低。