[发明专利]一种紫花苜蓿抗逆基因及其应用

权利要求书

1.一种紫花苜蓿抗逆基因，其特征在于，该紫花苜蓿抗逆基因全长的核苷酸序列如下：

ATGGCTACTAACGAAGGTGACATGTTCTCAGCAGAGATTGTGAACCGTGGGATTGAATCATCGGGTCCGAATGCCGGTTCATTGACGTTCTCCGTTCGTGTTCGGAGACGGTTACCGGATTTTCTTCAATCTGTGAACCTTAAGTATGTGAAATTGGGTTACCATTATCTGATAAACCATGGTGTTTATTTGTTCACTATACCAATTTTACTTGTTGTGTTTAGTGCTGAGGTTGGTAGTCTTAGCAAAGAAGATCTTTGGAAGAAGATTTGGGAAGATGCAACTTATGATCTTGCATCTGTTCTCTCTTCTCTTGCTGTCTTTGTTTTCACTTTCACTCTTTACTTCATGTCAAGGCCACGTCCTATTTATCTCATTGATTTTGCATGCTATCAACCTGATGATGAACTCAAGGTATCTAGGGAGCAATTGATAGAGCTAGCAAGAAAATCAGGAAAATTTGATGAAGGAAGTCTAGAATTCCAGAAGAGGATAGTAATGTCATCAGGAATAGGTGATGAAACATACATTCCAAGATCAGTGATAGCATCAAGTGAAAACACAGCAACAATGAAAGAAGGTAGAGCTGAGGCATCAATGGTTATGTTTGGAGCACTTGATGAACTCTTTGAAAAAACAGGAATTAGACCAAAAGATGTTGGTGTTCTTGTAGTAAATTGTAGCATATTCAACCCAACACCATCATTGTCAGCCATGATTATAAATCATTATAAGATGAGGGGAAATATTTTGAGTTATAATCTTGGTGGTATGGGTTGTAGTGCTGGAATTATTTCTGTTGATTTGGCTAGGGATATACTTCAATCTAATCCTGGTAACTATGCTGTTGTTGTGAGTACTGAAATGGTTGGATTTAATTGGTATCAAGGAAAAGAAAGATCAATGCTTATTCCAAATTGTTTCTTTCGTATGGGTTGTTCTGCTGTTTTGCTCTCTAACCGTCGTCGTGATTTTGGCCGCGCGAAATATCGTCTTGAACACATTGTTCGTACACATAAAGGCGCTGATGATCGCAGTTTCAGGTGTGTGTACCAAGAGGAAGACGATCAGAAATTCAAGGGAATAAAGATAAGCAAAGACTTAATTGAAATTGGTGGTGAAGCTCTCAAAACAAACATCACAACACTAGGACCATTGGTCCTACCCTTTTCAGAACAGCTTATTTTCTTTGCTACATTAGTGTGGAGGAACTTCTTTGGTGGTGGAAAATCTGATAAAAATTCACCATCATCAAACAAGCCATACATTCCTAACTACAAACTAGCTTTTGAGCATTTTTGTGTGCATGCTGCTAGCAAAACCATTCTTGATGAGCTTCAAAAGAATCTTGAATTGAGTGACAAGAACATGGAAGCCTCTAGAATGACGCTGCACCGATTCGGCAACACTTCTAGTAGCAGCATTTGGTATGAACTTGCTTATATGGAAGCTAAGGAAAAAGTTAAAAGAGGAGACCGTGTTTGGCAACTCGCTTTTGGTTCTGGTTTTAAGTGTAACAGTGCTGTTTGGCGTTCTATGCGTCGTGTCACAAAACCTTCTTCTAGGAACCCTTGGCTTGACTGCATTGATGCATATCCTGCTTCTCTCAATTAA。

2.权利要求1所述的紫花苜蓿抗逆基因用于培育耐旱的烟草品种及具有保水能力的番茄的应用。

3.如权利要求2所述的应用，其特征在于，按以下步骤进行：

1）将紫花苜蓿抗逆基因和植物双元表达载体pCAMBIA1301用双酶切后再用T4连接酶连接，构建烟草过表达载体；

将构建的烟草过表达载体质粒用电转化法导入农杆菌GV3101中，使用烟草叶盘法侵染植物叶片，利用潮霉素筛选抗性植株；

2）将紫花苜蓿抗逆基因和植物表达载体PBI121用In-fusion技术，构建番茄过表达载体；

将构建的番茄过表达载体电转化法导入农杆菌GV3101中，使用农杆菌浸染Micro-Tom番茄叶盘，利用卡那霉素筛选抗性植株；

3）将步骤1）或步骤2）所筛选得到的抗性植株通过炼苗，移栽入土中，观察植物生长状态；

所述紫花苜蓿抗逆基因全长的核苷酸序列如下：

ATGGCTACTAACGAAGGTGACATGTTCTCAGCAGAGATTGTGAACCGTGGGATTGAATCATCGGGTCCGAATGCCGGTTCATTGACGTTCTCCGTTCGTGTTCGGAGACGGTTACCGGATTTTCTTCAATCTGTGAACCTTAAGTATGTGAAATTGGGTTACCATTATCTGATAAACCATGGTGTTTATTTGTTCACTATACCAATTTTACTTGTTGTGTTTAGTGCTGAGGTTGGTAGTCTTAGCAAAGAAGATCTTTGGAAGAAGATTTGGGAAGATGCAACTTATGATCTTGCATCTGTTCTCTCTTCTCTTGCTGTCTTTGTTTTCACTTTCACTCTTTACTTCATGTCAAGGCCACGTCCTATTTATCTCATTGATTTTGCATGCTATCAACCTGATGATGAACTCAAGGTATCTAGGGAGCAATTGATAGAGCTAGCAAGAAAATCAGGAAAATTTGATGAAGGAAGTCTAGAATTCCAGAAGAGGATAGTAATGTCATCAGGAATAGGTGATGAAACATACATTCCAAGATCAGTGATAGCATCAAGTGAAAACACAGCAACAATGAAAGAAGGTAGAGCTGAGGCATCAATGGTTATGTTTGGAGCACTTGATGAACTCTTTGAAAAAACAGGAATTAGACCAAAAGATGTTGGTGTTCTTGTAGTAAATTGTAGCATATTCAACCCAACACCATCATTGTCAGCCATGATTATAAATCATTATAAGATGAGGGGAAATATTTTGAGTTATAATCTTGGTGGTATGGGTTGTAGTGCTGGAATTATTTCTGTTGATTTGGCTAGGGATATACTTCAATCTAATCCTGGTAACTATGCTGTTGTTGTGAGTACTGAAATGGTTGGATTTAATTGGTATCAAGGAAAAGAAAGATCAATGCTTATTCCAAATTGTTTCTTTCGTATGGGTTGTTCTGCTGTTTTGCTCTCTAACCGTCGTCGTGATTTTGGCCGCGCGAAATATCGTCTTGAACACATTGTTCGTACACATAAAGGCGCTGATGATCGCAGTTTCAGGTGTGTGTACCAAGAGGAAGACGATCAGAAATTCAAGGGAATAAAGATAAGCAAAGACTTAATTGAAATTGGTGGTGAAGCTCTCAAAACAAACATCACAACACTAGGACCATTGGTCCTACCCTTTTCAGAACAGCTTATTTTCTTTGCTACATTAGTGTGGAGGAACTTCTTTGGTGGTGGAAAATCTGATAAAAATTCACCATCATCAAACAAGCCATACATTCCTAACTACAAACTAGCTTTTGAGCATTTTTGTGTGCATGCTGCTAGCAAAACCATTCTTGATGAGCTTCAAAAGAATCTTGAATTGAGTGACAAGAACATGGAAGCCTCTAGAATGACGCTGCACCGATTCGGCAACACTTCTAGTAGCAGCATTTGGTATGAACTTGCTTATATGGAAGCTAAGGAAAAAGTTAAAAGAGGAGACCGTGTTTGGCAACTCGCTTTTGGTTCTGGTTTTAAGTGTAACAGTGCTGTTTGGCGTTCTATGCGTCGTGTCACAAAACCTTCTTCTAGGAACCCTTGGCTTGACTGCATTGATGCATATCCTGCTTCTCTCAATTAA。