[发明专利]一种超敏化学发光HRP底物液及其制备方法

说明书

本发明公开了一种超敏化学发光HRP底物液，该底物液由A液和B液等体积复配而成，所述A液为1000mL,pH＝9.0，其中，含有Tris 24.23g；吩噻嗪‑10‑基‑丙基磺酸钠盐2.060g；4‑二甲氨基吡啶0.37g；鲁米诺0.44g；1mol/L的NaOH溶液1mL；余量为盐酸和纯水；所述B液为1000mL,pH＝3.5～5.0，其中，含有过氧尿素1.175g；冰乙酸2.875mL；余量为纯水与5mol/L的NaoH溶液。本发明采用目前国际最先进的增敏技术，二次增敏，使得底物液灵敏度高，高于国外Thermo Pierce厂家同类产品，发光平稳，背景更低,可达到pg级，大大节省了抗体与样品的用量，特别适用于检测低丰度的蛋白质含量。

技术领域

本发明涉及超敏化学发光技术领域，具体涉及一种超敏化学发光HRP底物液及其制备方法。

背景技术

化学发光技术是免疫诊断技术中的一种，而免疫诊断技术的差别，大体上在抗原抗体包被和信号检测这两个环节，目前市面上化学发光HRP底物液无论应用于科研中或是应用于医学免疫诊断，大部分都依赖于进口，且价格昂贵，而国产的大部分发光液灵敏度不高，发光不稳定或是对Western blot实验操作的聚乙烯纤维膜存在损伤性。

发明内容

为解决上述问题，本发明提供了一种超敏化学发光HRP底物液及其制备方法，采用目前国际最先进的增敏技术，二次增敏，使得底物液灵敏度高，发光平稳，背景更低,可达到pg级。

为实现上述目的，本发明采取的技术方案为：

一种超敏化学发光HRP底物液，所述A液由Tris、吩噻嗪-10-基-丙基磺酸钠盐、4-二甲氨基吡啶、鲁米诺、NaOH溶液、纯水、盐酸复配而成；所述B液由过氧尿素、冰乙酸、纯水、NaoH溶液复配而成。所述A液为1000mL,pH＝9.0，其中，含有Tris 24.23g；吩噻嗪-10-基-丙基磺酸钠盐2.060g；4-二甲氨基吡啶0.37g；鲁米诺0.44g；1mol/L的NaOH溶液1mL；余量为盐酸和纯水；

所述B液为1000mL,pH＝3.5～5.0，其中，含有过氧尿素1.175g；冰乙酸2.875mL；余量为5mol/L的NaoH溶液和纯水。

本发明还提供了上述一种超敏化学发光HRP底物液的制备方法，包括如下步骤：

S1、A液的配置

S11、配置Tris缓冲液：称取24.23g Tris加900mL超纯水溶解，得Tris缓冲液；

S12、称取吩噻嗪-10-基-丙基磺酸钠盐2.060g，加入到所得的Tris缓冲液中，搅拌至溶解；

S13、称取4-吗啉基吡啶0.37g，加入到上述的Tris缓冲液中，搅拌至溶解；

S14、称取鲁米诺0.44g，加入1mL 1mol/L的NaOH溶液，充分溶解后，再加入到缓冲液中，搅拌至溶解；

S15、向所得的缓冲液中加入适量盐酸调pH至9.0，定容为1000mL，配置完后避光保存；

S2、B液配置方法

S21、取2.875mL冰乙酸加入到950mL超纯水中，用5mol/L的NaOH溶液调pH至3.5～5.0；

S22、称取过氧尿素1.175g加入到上述液体中，搅拌至溶解，定容为1000mL，得B液；

S3、将A液与B液等体积混合后，即得，现用现配。

本发明具有以下有益效果：