[发明专利]一种Omega-3制备大电导钙激活钾通道开放剂的方法

说明书

本发明涉及医药技术领域，具体为一种Omega‑3制备大电导钙激活钾通道开放剂的方法，包括以下制备步骤：步骤一：富集EPA和DHA；步骤二：皂化；步骤三；制备混合脂肪酸；步骤四：银离子络合；步骤五：解离络合物；步骤六：蒸发提纯；步骤七：制备母液。有益效果为：本发明采用银离子作为络合剂，利用Omega‑3中物质双键数的不同，实现EPA和DHA分离，并采用氯化钠作为沉淀剂回收银离子，避免银离子损失，富集后的DHA纯度达85%，收率达69%，能耗低，操作简单，条件温和，周期短，收率高。

技术领域

本发明涉及医药技术领域，具体为一种Omega-3制备大电导钙激活钾通道开放剂的方法。

背景技术

大电导钙离子激活钾通道（BK通道）广泛分布于血管平滑肌细胞膜上，参与血管张力调节。EPA和DHA可被细胞色素P450环氧化酶（CYP450）代谢，生成类二十烷酸和其它自体活性物质，发挥生物学作用。研究表明，DHA是通过CYP450环氧化酶产生的代谢产物使BK通道激活，而不是它自身的直接作用。DHA的CYP450环氧化物EDPs是重要的BK通道激活剂，EDPs均能够呈浓度依赖性地扩张冠状动脉，增加血管平滑肌细胞膜上BK通道的开放概率。例如，13,14-EDP扩张动脉和增加BK通道开放概率的半效浓度是一致的，因而认为EDPs扩张动脉的机制主要是由于其对BK通道的激活。

DHA，二十二碳六烯酸，属于Omega-3不饱和脂肪酸家族中的重要成员。Omega-3不饱和脂肪酸常见于深海鱼油、海豹油和某些植物中，所以从Omega-3中提取出DHA，然后经CYP450代谢，是一种制备大电导钙激活钾通道开放剂的可靠途径。但是鱼油中DHA含量少，必须要经过富集、浓缩。

发明内容

本发明的目的在于提供一种Omega-3制备大电导钙激活钾通道开放剂的方法，以解决上述背景技术中提出的问题。

为实现上述目的，本发明提供如下技术方案：一种Omega-3制备大电导钙激活钾通道开放剂的方法，包括以下制备步骤：

步骤一：富集EPA和DHA，将Omega-3和超临界CO₂进行混合，用高压恒流泵泵入萃取塔中，进行超临界萃取，塔顶得到轻组分，塔底得到的重组分为EPA和DHA的富集物；

步骤二：皂化，向EPA和DHA的富集物中加入氢氧化钠溶液，在60-65℃恒温水浴下，皂化，回流30-90 min后，冷却至室温，滤去不皂化物，得到不饱和脂肪酸盐溶液；

步骤三：制备混合脂肪酸，向不饱和脂肪酸盐溶液中加入氯化钠，析出不饱和脂肪酸盐，对不饱和脂肪酸盐用去离子水水洗至中性后，用石油醚萃取，得到含石油醚的混合脂肪酸；

步骤四：银离子络合，将含石油醚的混合脂肪酸转移至搅拌釜中，开启搅拌，搅拌速度控制为60-120 rpm，釜内温度控制为40-60℃，加入过量硝酸银水溶液，持续反应90-120min后，静置分层，分液分离石油醚相，得到银离子络合溶液；

步骤五：解离络合物，对水相先用饱和氯化钠溶液洗涤，直至不再出现沉淀物后，用去离子水洗涤，回收沉淀物，液相中加入石油醚，萃取，合并石油醚相，得到DHA-石油醚混合物；

步骤六：蒸发提纯，将DHA-石油醚混合物转移至蒸发塔中，进行减压蒸发，塔底回收石油醚，塔顶得到DHA；

步骤七：制备母液，将DHA经CYP450代谢后的产物溶于无水乙醇中，制备成母液，分装避光保存在-20℃备用。

优选的，步骤一中，所述Omega-3中，EPA的质量分数为37%，DHA的质量分数为22%。

优选的，步骤一中，所述萃取塔中填料为金属丝网波纹填料，其丝经为0.2 mm，丝网为80目，填料高度为40 mm。