[发明专利]一种与黄瓜果实不规则条纹性状紧密连锁的SNP标记及其应用有效
申请号: | 201910315402.3 | 申请日: | 2019-04-18 |
公开(公告)号: | CN110205396B | 公开(公告)日: | 2023-04-11 |
发明(设计)人: | 娄群峰;宋蒙飞;程凤;陈劲枫 | 申请(专利权)人: | 南京农业大学 |
主分类号: | C12Q1/6895 | 分类号: | C12Q1/6895;C12N15/11 |
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地址: | 210095 江苏省*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 黄瓜 果实 不规则 条纹 性状 紧密 连锁 snp 标记 及其 应用 | ||
1.一种SNP标记检测方法在黄瓜果实条纹性状鉴定中的应用,其特征在于,该SNP标记与黄瓜果实不规则条纹基因紧密连锁,所述的SNP标记的位点为黄瓜‘Chinese Long’基因组v2版本参考序列黄瓜1号染色体998383核苷酸位点上,具有A/G的多态性,所述的黄瓜品种为‘长春密刺’;
设计引物对,以黄瓜基因组DNA为模板进行PCR扩增,所述的引物对名称及正反向序列分别为:SF-SNPI,正向引物为:SEQ ID NO:2,反向引物:SEQ ID NO:3,扩增序列如SEQ IDNO:1所示,扩增长度为675bp,所述SNP标记位于扩增产物第440bp位点,存在A/G多态性;
所述SNP标记检测方法,包括以下步骤:
(1)提取黄瓜叶片组织样品总DNA;
(2)用已提取的黄瓜基因组DNA为模板,使用所述的引物对SF-SNPI进行PCR扩增;
(3)扩增产物进行测序,分析测序结果,分析位于扩增产物序列第440bp位点的A/G多态性;
(4)基于该位点SNP多态性判读基因型为AA、GG以及AG三种基因型;
(5)根据基因型确定黄瓜果实不规则条纹的有无:GG基因型为有不规则条纹黄瓜,AA及AG基因型为无不规则条纹黄瓜。
2.权利要求1所述的引物对在筛选黄瓜果实不规则条纹性状的辅助育种中的应用,所述引物对如序列SEQ ID NO:2、SEQ ID NO:3所示,使用所述的引物对进行PCR扩增,根据扩增产物判读如权利要求1所述SNP标记的基因型,根据基因型确定黄瓜果实不规则条纹的有无:GG基因型为有不规则条纹黄瓜,AA及AG基因型为无不规则条纹黄瓜,所述黄瓜品种为‘长春密刺’。
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