[发明专利]生物标志物用于预测血管再狭窄以及检测试剂盒

说明书

本发明提供了生物标志物在制备用于预测患者在支架介入手术后发生再狭窄的试剂盒中的应用以及相关的检测试剂盒，其中所述生物标志物包含神经酰胺d18：1/18：2、鞘磷脂SM d18：1/20：0、鞘磷脂SMd18：1/18：2、卵磷脂PC 18：2/20：4、鞘氨醇1‑磷酸酯和磷脂酰丝氨酸PS18：1/18：1。所述生物标志物能够有效地作为预测冠心病患者经经皮冠状动脉成形术PCI后发生支架内再狭窄的发生概率，具有无创、准确、早期并且精确度高的优点。

技术领域

本发明涉及心血管治疗和诊断领域，尤其涉及一种用于预测血管再狭窄的生物标志物及其应用。

背景技术

冠心病是人类最主要的死亡疾病之一，经皮冠状动脉成形术(Percutaneouscoronary intervention，PCI)已得到广泛应用，但血管再狭窄一直成为制约冠脉介入手术发展的瓶颈，药物支架(DES)与金属裸支架相比，明显降低了PCI术后支架内再狭窄(ISR)发生率，但DES在预防ISR作用的同时也延缓了血管内皮化的修复，从而增加了ISR的危险因素。

代谢组学是继基因组学、转录组学和蛋白质组学之后系统生物学的又一重要分支。应用高通量检测、多元数据分析等技术，研究生物体在特定病理生理状态下所有小分子量代谢产物，以展现生物体在某些基因修饰或外界环境刺激下的动态代谢应答过程，并从代谢的角度对生物体进行研究，能对生物体当前生理和病理生理过程相关的代谢状态进行积分描绘。

本领域仍然需要改善的用于预测血管再狭窄的生物标志物，尤其是通过代谢组学获得这些生物标志物，以便为支架术后的治疗提供帮助

发明内容

本发明的目的是提供一种新型的用于预测血管再狭窄(尤其是经皮冠状动脉成形术后的再狭窄)的生物标志物及其制备检测试剂盒的应用。所述生物标志物能够准确快速地预测经皮冠状动脉成形术后的再狭窄的发生概率，以便可以提前进行干预和治疗。

为实现上述目的，本发明提出了以下技术方案：

在一个实施方案中，本发明提供了生物标志物在制备用于预测血管再狭窄的试剂盒中的应用，所述生物标志物包含神经酰胺d18：1/18：2、鞘磷脂SM d18：1/20：0、鞘磷脂SMd18：1/18：2、卵磷脂PC 18：2/20：4、鞘氨醇1-磷酸酯和磷脂酰丝氨酸PS 18：1/18：1。

优选地，所述试剂盒是高效液相色谱试剂盒。

优选地，所述试剂盒还包含用于提取样品的提取溶剂、用于高效液相色谱检测的流动相和用于高效液相色谱检测的色谱柱。

优选地，所述提取溶剂包含体积比40-50∶40-50∶20-30的甲醇、乙腈和水。

优选地，用于高效液相色谱检测的流动相包含体积比为40-50∶40-50的乙醇和异丙醇。

优选地，所述色谱柱选自氨基色谱柱和Biphenyl色谱柱中的至少一种。

优选地，血管再狭窄为经皮冠状动脉成形术(PCI)后的支架内再狭窄(ISR)。

在另一个实施方案中，本发明提供了一种筛选用于预测血管再狭窄的多种生物标志物的方法，包括下列步骤：

在经皮冠状动脉成形术之前，获得多个冠心病患者的血清样品；

在进行经皮冠状动脉成形术1个月之后，对所有患者进行冠状动脉造影，将再狭窄大于50％的患者中限定为ISR样品组，从再狭窄小于50％的患者中选择同样数量的患者作为对照组；

获得ISR样品组和对照组的血清样品；

采用包含体积比40-50∶40-50∶225的甲醇、乙腈和水的溶剂对所述各个血清样品进行提取，从而获得提取物；