[发明专利]用于对包埋在基质中的蛋白聚合物进行染色的方法

说明书

本发明涉及一种用于对包埋在基质中的蛋白聚合物进行染色的方法，包括：将含有蛋白聚合物的基质与考马斯亮蓝染色液接触以对所述蛋白聚合物进行染色；用高温处理的步骤将所述基质中的考马斯亮蓝洗去以进行脱色，获取考马斯亮蓝染色结果图像；将所述基质使用银染致敏液处理后，在高温条件下与水接触；将所述基质与银染染色液接触以对所述蛋白聚合物进行染色；将所述基质与银染显色液接触，获取银染结果图像。该方法可对包埋在基质中的蛋白聚合物先后进行考马斯亮蓝染色和银染，节约实验时间，结果更为准确，系统误差更小。

技术领域

本发明涉及生物技术领域，具体而言，涉及一种用于对包埋在基质中的蛋白聚合物进行染色的方法。

背景技术

考马斯亮蓝蛋白胶快速染色液是一种即用型快速灵敏而且安全的染液，用于SDS－PAGE或者非变性胶的快速染色，在半小时内就可以出结果。主要用于蛋白纯度的分析，操作简单，但灵敏度不高，只能到微克级，在对蛋白纯度要求较低，需要快速分析样品纯度时选择该法进行染色分析。

银染法是在碱性条件下，将蛋白带上的硝酸银(银离子)还原成金属银，以使银颗粒沉积在蛋白带上。染色的程度与蛋白中的一些特殊的基团有关(如琉基、碳基等)，不含或者很少含半胱氨酸残基的蛋白质有时候呈负染。主要用于蛋白纯度的分析，其灵敏度高于考马斯亮蓝，检测极限是2～5.0ng/蛋白条带，但成本较高，费时费力；在对蛋白纯度要求较高时，使用该法进行分析。

目前蛋白聚丙烯酰胺凝胶凝胶电泳分析主要集中在单独的考马斯亮蓝染色法及单独的银铵溶液染色法。

两者结合，在相同的操作条件下，比较考染与银染的纯度分析差异，可减少单个比较时操作误差的影响，使得结果可信度更高。但如果只是简单的将这两种方式结合起来，会出现耗时长及银染染色效果不佳的问题。

有鉴于此，特提出本发明。

发明内容

本发明涉及一种用于对包埋在基质中的蛋白聚合物进行染色的方法，包括：

a)将含有蛋白聚合物的基质与考马斯亮蓝染色液接触以对所述蛋白聚合物进行染色；

所述考马斯亮蓝染色液中含有0.001％(v/v)～0.003％(v/v)的甲醛；

b)用包括80℃～100℃处理的步骤将所述基质中的考马斯亮蓝洗去以进行脱色，获取考马斯亮蓝染色结果图像；

c)将所述基质使用银染致敏液处理后，在80℃～100℃的条件下与水接触；

d)将所述基质与银染染色液接触以对所述蛋白聚合物进行染色；

e)将所述基质与银染显色液接触，获取银染结果图像。

与现有技术相比，本发明的有益效果为：

该方法可对包埋在基质中的蛋白聚合物先后进行考马斯亮蓝染色和银染，节约实验时间，操作更为简单，耗时更短。

两种方法连用减少了基质的制备工作；实现同一样品同一基质在不同条件维度下分析，所得结果更为准确，系统误差更小。

附图说明

为了更清楚地说明本发明具体实施方式或现有技术中的技术方案，下面将对具体实施方式或现有技术描述中所需要使用的附图作简单地介绍，显而易见地，下面描述中的附图是本发明的一些实施方式，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据这些附图获得其他的附图。

图1为本发明比较例1的考马斯亮蓝染色图像；

图2为本发明比较例1的银染染色图像；

图3为本发明实施例1的考马斯亮蓝染色图像；

图4为本发明实施例1的银染染色图像；