[发明专利]食管癌样本的内参miRNA及其应用

说明书

本发明涉及食管癌样本的内参miRNA及其应用，其中，用于作为食管癌样本的内参miRNA包括hsa‑miR‑423‑5p和/或hsa‑miR‑16‑5p，其中，hsa‑miR‑423‑5p，在样本中表现出表达丰度高、波动幅度小，在不同类型样本间无显著差异的特定，适合作为食管癌样本，尤其是中国人群的食管癌样本的内参miRNA。

技术领域

本发明涉及miRNA检测领域，具体而言，涉及食管癌样本的内参miRNA及其应用。

背景技术

食管癌(esophageal carcinoma,EC)是全世界高发的消化道恶性肿瘤之一,全世界每年约有40万人死于本病，严重危害民众健康；食管癌发病具有明显的地区差异，我国是世界上食管癌高发地区之一，平均发病率约为22.14/10万，同期死亡率16.77/10万，居恶性肿瘤死亡率的第4位。食管癌具有抵抗放化疗、局灶复发或远端转移的特性，五年生存率约为15-25％。食管癌的早期症状多不典型，进展期以进行性吞咽困难为典型临床表现。

miRNA是一种广泛存在于真核生物、平均长度约22(19-24)个核苷酸的非编码小分子RNA，通过结合靶信使RNA(messenger RNA，mRNA)的3’非编码区，特异性抑制靶mRNA，在基因表达转录后调控中发挥关键作用，与疾病密切相关，诸如各种癌症。

就食管癌而言，目前的研究结果表明，miRNA在食管癌的发生、发展和诊断治疗中发挥重要作用，有望通过miRNA实现食管癌的早期诊断、预后/疗效监测甚至为食管癌的治疗提供新靶点。

然而，尽管已取得一定进展，miRNA在食管癌的研究与应用仍受到较大限制。每个miRNA研究者都必须面对且十分棘手的问题在于在检测健康受试者和食管癌相关患者时，缺乏可靠的内参基因，导致样本间miRNA的比较变得困难。另外，目前关于食管癌miRNA的研究主要集中于欧美国家的白种人群，缺少适用于亚种人群，特别是中国人群的miRNA内参。

有鉴于此，特提出本发明。

发明内容

本发明的第一目的在于提供hsa-miR-423-5p作为食管癌样本的内参miRNA的应用，所述内参miRNA具有在正常受试者和食管癌患者中表达水平高、易于检测，且表达水平基本一致，适合均一化的优点，为食管癌诊断的优质内参miRNA。

本发明的第二目的在于提供一种食管癌诊断试剂和/或诊断试剂盒，所述诊断试剂和/或诊断试剂盒包括食管癌miRNA标志物的检测试剂和前述内参miRNA的检测试剂，该诊断试剂和/或诊断试剂盒包括优质内参miRNA，有利于获得准确的诊断结果。

为了实现本发明的上述目的，特采用以下技术方案：

Hsa-miR-423-5p作为食管癌样本的内参miRNA的应用。

在一些具体的实施方式中，所述样本的受试者为亚洲人群，优选地，所述亚洲人群为中国人群。

在一些具体的实施方式中，所述样本来自于无症状受试者或食管癌疑似患者。

在一些具体的实施方式中，所述样本来自于治疗前的食管癌患者或治疗后的食管癌患者。

在一些具体的实施方式中，所述样本为组织样本或体液样本，所述体液样本优选为血液样本，可选地，所述血液样本为血清样本或血浆样本。

在一些具体的实施方式中，所述内参miRNA用于目的miRNA的标准化。

在一些具体的实施方式中，所述应用包括：测定样本中目的miRNA和内参miRNA的绝对浓度，将目的miRNA的绝对浓度和内参miRNA的绝对浓度进行比较，获得标准化后的miRNA浓度。