[发明专利]用于免疫增强的锰组合物

说明书

本发明提供了包含新生沉淀锰和/或胶体锰的免疫增强组合物和疫苗组合物，其制备方法，以及它们用于增强免疫和或疫苗接种的用途。

技术领域

本发明提供了用于增强免疫的二价锰胶体或二价锰新生沉淀，以及其 用于增强免疫的用途，这种免疫增强用途例如可用于作为免疫佐剂、抗病 毒或抗肿瘤。

背景技术

机体通过天然免疫系统和适应性免疫系统保护机体免于外来病原体 的侵染。天然免疫对于适应性免疫有着促进作用。当机体被病源体感染时， 首先启动了天然免疫反应，通过模式识别受体识别病原体的病源相关分子 模式，激活多种信号通路，如TLR通路(1)、RLR通路(2)、cGAS-STING 通路(3)、炎症小体活化(4)等，这些通路的激活导致下游众多细胞因子的 产生，包括I型干扰素、IL-1β、IL-18等。

I型干扰素通过自分泌和旁分泌途径可激活JAK-STAT通路，诱导 大量抗病毒基因的表达，达到抵抗病毒感染的效果(5,6)。同时I型干扰素 可促进抗原递呈细胞的成熟(7)，抗原递呈细胞将病源微生物或肿瘤抗原 递呈给T细胞，激活抗原特异性CD4⁺T细胞和CD8⁺T细胞；同时也可 促进B细胞活化产生抗原特异性抗体；及促进产生记忆性B细胞及免疫 记忆。

促炎因子IL-1β能直接作用于CD4⁺T细胞，促进T细胞的增殖(8)； IL-18可以有效增强Th1免疫反应，也可以促进T细胞和NK细胞的增殖 和细胞毒作用(9)。

目前已经被FDA批准在人身上使用的佐剂有四种：铝佐剂、MF59、 AS03、AS04。铝佐剂从1920年以来一直被广泛使用，被用于甲肝(HAV) 疫苗、乙肝(HBV)疫苗、百白破(DTP)疫苗、人乳头瘤病毒(HPV) 疫苗、流感嗜血杆菌(HiB)疫苗等。铝佐剂只能激活Th2反应(以抗体 产生为主的体液免疫)，不能激活Th1反应(以CD8⁺T细胞为主的细胞 免疫)(10)。AS04是包含MPL和铝盐的佐剂，被用于HPV疫苗和HBV 疫苗。该佐剂能激活NF-kB，产生促炎因子，具备了铝佐剂原来不具备 的激活Th1反应的能力。MF59是一种以角鲨烯为油相制成的油包水类型

目前未批准临床应用，但在实验室中可使用的佐剂有很多，其中很多 效果很好，但是由于其副作用限制了在临床上的应用，如弗氏佐剂的矿物 油成分代谢能力差，在注射部位会形成结节。还有细胞因子类型的佐剂， 如白细胞介素-2、干扰素，它们的缺点是成本昂贵。

目前有报道证明激活cGAS-STING通路的配体能够作为佐剂，如 DMXAA(12)、c-di-GMP(13)、cGAMP(14)、chitosan(15)。

CN107412260A公开了二价锰是一种cGAS-STING通路激活剂，具 有增强免疫的作用，例如可用作免疫佐剂。然而，在进一步研究中，发明 人意外发现二价锰本身还存在一些缺陷，还需要改进的方案以消除至少一 种所述缺陷。

发明内容

发明人在进一步研究二价锰免疫增强作用中发现，尽管二价锰溶液可 以在机体中产生免疫增强作用，然而这种免疫增强作用还不够高。更重要 的是，研究过程中还发现，当希望提高二价锰溶液的浓度，以便提高免疫 增强作用时，很容易产生锰沉淀，导致无法获得均匀稳定的高浓度二价锰 溶液，使得实验的可重复性无法得到有效保证。这种锰沉淀随着放置时间 增加而逐渐团聚化增长。

在无法实现期望的高浓度二价锰溶液的情况下，发明人不得已使用二 价锰沉淀继续其免疫增强作用的研究。由于实验操作的疏忽，发明人无意 中使用了放置不同时间的二价锰沉淀。发明人意外发现，不同放置时间的 二价锰沉淀具有不同的免疫增强作用，而且新生沉淀的免疫增强作用显著 优于放置时间更长的锰沉淀。发明人进一步比较了二价锰溶液和放置不同 时间的二价锰沉淀，又意外地发现，新生锰盐沉淀的免疫增强作用竟然还 显著优于二价锰溶液。