[发明专利]一种复方氨基酸注射液（5%）中胱氨酸的含量测定方法

说明书

本发明提供一种复方18AA‑II氨基酸注射液（5%）中胱氨酸的含量测定方法，在该方法中供试品进样前先进行热处理1.5‑2小时，消除焦亚硫酸钠对胱氨酸检测的干扰，本发明提供的检测方法简单，成本低廉，解决了复方18AA‑II氨基酸注射液（5%）中胱氨酸含量无法检测的问题。

技术领域

本发明涉及药物领域，具体涉及一种复方18AA-II氨基酸注射液（5%）中胱氨酸的测定方法。

背景技术

氨基酸类药物适用于各种情况下机体氨基酸不足的治疗。复方18AA-II氨基酸注射液（5%）内含18种氨基酸，因主成分数量多且溶解度的区别小，采用常规的色谱柱极性洗脱的方法无法得到合格的分离度，目前含量检测方法多用离子交换色谱法，根据各种氨基酸与阳离子交换色谱柱的亲和程度不同，采用不同pH的流动相按梯度进行洗脱，先后洗脱下来的氨基酸组分经过与茚三酮反应显色后进行紫外吸收检测，复方18AA-II氨基酸注射液（5%）中含0.02%的胱氨酸，胱氨酸含量较小，检测过程中发现胱氨酸含量检测结果与制剂制备的投料量不对应。专利CN 105588900也提出胱氨酸检测含量波动较大，测定结果准确度不佳，重现性差。此专利提供了一种复方18AA-II氨基酸注射液中胱氨酸的含量检测方法，认为胱氨酸含量小且出峰时间正好在流动相转化时间附近导致，通过改变梯度洗脱的方式解决胱氨酸含量的检测问题。但是我们在试验过程中发现即使改变洗脱梯度使胱氨酸在流动相无变化时出峰，胱氨酸的含量依旧与投料量不吻合，样品间检测结果波动大。专利CN 103278593 提供一种氨基酸注射液中胱氨酸、半胱氨酸及其盐的含量测定方法，采用过氧化氢氧化法，此法操作复杂，而且没有检测氨基酸注射液中胱氨酸的含量，仅检测了单独的胱氨酸的含量，我们在试验过程中发现复方18AA-II氨基酸注射液（5%）采用过氧化氢氧化法检测时色氨酸含量受到影响，专属性不强。本实验室人员经过多次试验分析复方18AA-II氨基酸注射液（5%）中胱氨酸含量检测结果波动大的原因，发现产品中的抗氧剂焦亚硫酸钠对胱氨酸的检测有影响，供试品中焦亚硫酸钠的量不同，检测的胱氨酸结果不同，焦亚硫酸钠属于抗氧剂且热不稳定，检测时对供试品进行热处理，即能消除焦亚硫酸钠对胱氨酸检测的影响，热处理后的供试品采用同样的含量检测方法胱氨酸的含量检测与投料量对应良好，该方法简单易行，成本低廉，解决了复方18AA-II氨基酸注射液（5%）中胱氨酸含量无法检测的问题。

发明内容

本发明提供一种复方18AA-II氨基酸注射液（5%）中胱氨酸的测定方法，其特征在于检测前对供试品进行提前处理消除焦亚硫酸钠对胱氨酸含量检测的影响。

本发明提供的检测方法中供试品处理方法采用热处理法，将待测样品100℃水浴加热，加热时间1-2小时。

本发明提供的复方18AA-II氨基酸注射液（5%）中胱氨酸的测定方法采用常用的氨基酸分析仪进行检测，方法简单，成本低廉，解决了复方18AA-II氨基酸注射液（5%）中胱氨酸含量无法检测的问题。

具体实施方式：

实施例一：

试验样品：复方氨基酸注射液18AA-II 250ml：12.5g（总氨基酸）厂家：费森尤斯卡比华瑞制药有限公司

检验设备：日立L-8080氨基酸分析仪

色谱柱 ：Ion Exchange Column #2622SC-PH 4.6*60mm

流动相：B1、B2 、B3、B4为不同pH的酸性缓冲液，B5为超纯水，B6为碱液均为设备专用。

反应相：R1为茚三酮溶液，R2为茚三酮缓冲溶液，R3为5%乙醇水，用于清洗。

色谱条件：

高温反应器温度：130℃；茚三酮流速：0.25ml/min;氨基酸分析柱温：57℃，采集时间：53min，流速：0.4ml/min，检测波长为440nm和570nm