[发明专利]一种溪黄草活性成分的低温提取方法

说明书

本发明公开了一种溪黄草活性成分的低温提取方法，属于中药活性成分分离领域，该提取方法包括以下步骤：溪黄草破碎后与水混合，再加入活性酶进行酶解；酶解后过筛网，分离得到溪黄草提取液和溪黄草残渣；对溪黄草提取液进行离心，离心得到溪黄草上清液，对溪黄草上清液进行膜浓缩，即得溪黄草浓缩液；向溪黄草残渣中加入水，并进行超声处理，超声处理后过筛网即得酶溶解液；对酶溶解液进行离心，离心得到酶上清液，对酶上清液进行膜浓缩，即得酶浓缩液。本发明提取方法采用低温和酶解方法提取溪黄草活性成分，确保活性成分有效，且活性成分提取效率较好；另外，提取过程中采用超声和膜浓缩回收活性酶，使酶循环使用。

技术领域

本发明属于中药活性成分分离领域，尤其涉及一种溪黄草活性成分的低温提取方法。

背景技术

溪黄草具有清热利湿、退黄和凉血散瘀的功效，临床上其用于治疗湿热黄疸、湿热泻痢、跌打瘀肿等，且均取得显著疗效。同时，其还可以用于治疗急性黄疸型肝炎、急性胆囊炎、痢疾和肠炎等病症。

溪黄草中有效成分包括活性小分子化合物、多糖及挥发性成分等，其中二萜类化合物、三萜类化合物、多酚类化合物是其最主要活性成分。水热提取法是从固体天然产物中提取活性成分的最常用方法，溪黄草活性成分普遍是使用高温进行蒸煮，后续再采用高温蒸发实现水分与活性成分的分离。然而，这种方法存在许多不足：温度高、提取时间长、能耗大，高温会破坏溪黄草活性成分的活性；如中国发明专利CN02135069.8和CN200710026843.9公开采用了高温提取溪黄草活性成分。

因此，有必要设计出一种溪黄草活性成分的低温提取方法，该低温提取方法不会破坏溪黄草活性成分的活性。

发明内容

本发明目的在于克服现有技术存在的不足，而提供一种溪黄草活性成分的低温提取方法，该提取方法采用低温和酶解方法提取溪黄草活性成分，确保活性成分有效，且活性成分提取效率较好；另外，提取过程中采用超声和膜浓缩回收活性酶，使酶循环使用。

为实现上述目的，本发明采取的技术方案为：一种溪黄草活性成分的低温提取方法，其包括以下步骤：

S1)溪黄草破碎后与水混合，再加入活性酶，酶解的温度为15～50℃，酶解的时间为30～180min；所述活性酶至少为纤维素酶、果胶酶和木瓜蛋白酶中的一种；

S2)酶解后过250～300目的筛网，分离得到溪黄草提取液和溪黄草残渣；优选地，筛网的目数为300目；

S3)对所述溪黄草提取液进行离心，离心得到溪黄草上清液；对所述溪黄草上清液进行膜浓缩，即得溪黄草浓缩液；

S4)向所述溪黄草残渣中加入水，并进行超声处理，超声处理后过250～300目的筛网即得酶溶解液；超声处理的温度为15～50℃，超声处理的时间为30～180min；优选地，筛网的目数为300目；

S5)对所述酶溶解液进行离心，离心得到酶上清液；对所述酶上清液进行膜浓缩，即得酶浓缩液。

纤维素酶可将植物细胞壁的纤维素水解成水溶性糖，纤维素酶处理后的植物细胞壁水解破裂，有利于胞内活性成分的溶出；果胶酶可以使细胞间的果胶质降解，把细胞从组织内分离出来；木瓜蛋白酶可以分解蛋白质；因此，活性酶的加入可以有效地提高溪黄草活性成分的提取效果；活性酶至少为纤维素酶、果胶酶、木瓜蛋白酶中的一种，如：纤维素酶和果胶酶的混合物；果胶酶和木瓜蛋白酶的混合物；纤维素酶、果胶酶和木瓜蛋白酶的混合物。

本发明所采用的活性酶在低于50℃下仍具有提取活性，这样能减少高温提取带来的能源损耗，而且还避免了高温破坏活性成分的活性；但是，活性酶的价格比较昂贵，限制了低温生物酶解辅助提取技术的应用，本发明先将溪黄草提取液和溪黄草残渣分离出来，再用超声处理使溪黄草残渣上附着的活性酶溶解出来，再通过膜浓缩获得酶浓缩液，实现活性酶的循环使用。